铜转运P型ATP酶基因在微紫青霉菌菌株GXCR中抗铜的作用

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重金属是生物体必需的元素，然而过高的浓度会对有机体产生毒性。在真核和细菌中通过各种机制达到对重金属的抗性。铜转运蛋白P型ATP酶在真核生物中广泛存在，在胞内起着转运铜的作用，以达到对铜的抗性。本文根据已报道的与铜转运P型ATP酶同源的氨基酸序列，设计简并引物，在丝状真菌PenicilliumjanthinillumGXCR中扩增得到与铜转运P型ATP酶基因同源的部分序列。构建了该基因RNA干扰表达载体pCPXBn-ihp1，采用PEG/CacI2介导的方法转化GXCR原生质体，经过PCR检测、Southern杂交分析证实获得三个干扰突变体，对它们进行实时荧光定量PCR分析表明铜转运P型ATP酶基因表达水平降低，分别是野生型的24.92﹪、40.23﹪和32.89﹪。对突变体进行抗铜水平检测发现抗Cu2+能力与野生型对照有下降，表明铜转运P型ATP酶基因在丝状真菌微紫青霉菌PenicilliumjanthinillumGXCR的抗铜能力上起一定作用。

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作者
唐华英;
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作者单位

广西大学;

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授予单位广西大学;
学科微生物学
授予学位硕士
导师姓名李有志;
年度 2006
页码
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原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类微生物生理学;
关键词
重金属抗性; 铜转运P型ATP酶; RNA干扰; 定量PCR; 微紫青霉菌; 菌株; 抗性;

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