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SE-iFISH在原发性肝癌循环肿瘤细胞检测中的初步研究

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摘要

中英文对照缩略词表

前言

材料和方法

1.研究对象及样本采集

2.主要实验耗材及试剂

3 .主要实验设备及仪器

4.实验步骤

5.统计学方法

1.外周血中CTCs的检测情况

2.外周血中CTCs的数量与患者临床病理参数的关系

3.外周血中CTCs的生物学特征以及术前各CTCSs亚型和临床特征相关性

讨论

结论

参考文献

综述 循环肿瘤细胞检测原发性肝细胞癌的研究进展

致谢

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摘要

目的:
  原发性肝癌(Primary liver cancer,PLC)是世界上最常见的具有高发病率和死亡率的恶性肿瘤之一。现阶段的肝癌临床诊断方法存在着活检难度大,具有一定创伤性和并发症,低灵敏度、辐射性及价格昂贵等缺点。本研究通过差异富集-荧光免疫染色原位杂交技术(Subtraction Enrichrnent-Immunofluorescence in situ hybridization,SE-iFISH)技术初步检测对PLC患者的循环肿瘤细胞(Circulating tumor cells,CTCs)各个亚型数目,分析CTC数量以及CTCs亚型与PLC临床病理特征的关系,初步探讨CTCs在PLC早期检测及临床预后的预测上临床价值。
  方法:
  收集2015年11月到2016年6月北京清华长庚医院肝胆外科收治入院拟行手术的原发性肝癌患者20例,在患者手术前和手术一周后采集6mL的外周血,利用SE-iFISH技术分离、鉴别循环肿瘤细胞,同时收集并记录每一个患者的病理诊断结果和临床资料,以预测CTCs与肝癌预后的临床病理特征的相关性。
  结果:
  ①患者术前CTCs数量中位值为4个/6mL外周血,平均值为4.77±3.07;术后第7天CTCs数量中位值为10个/6mL外周血,平均值为10.27±6.29。②患者术前术后共检出8号染色体异倍体中三倍体个数为75(31.25%),四倍体个数为55(22.91%),五倍体个数为128(53.33%)。③患者手术一周后外周血中CTCs数量显著高于手术前(P<0.05)。患者手术前外周血中CTCs数量与AFP浓度,脉管癌的存在显著相关(P<0.05)。手术一周后外周血中的CTCs数量与肝炎病毒感染,门静脉癌栓和TNM分期显著相关(P<0.05)。
  结论:
  1.术一周后患者外周血中CTCs数量显著高于未手术之前,这表明了外科手术能引起癌细胞的远处转移。
  2.具有8号染色体≥5倍体的小CTC的特定亚型是PLC患者中癌症转移和复发的另一个关键参与者。它的术后数量与PLC患者预后不良有非常显着的相关性。
  3.手术后复发性PLC患者切除术后,≥5倍体的CTCs的特定亚型增加,与PLC患者预后不良有非常显著的相关性。

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