HPLC测定不同产地山药中3种成分含量的研究

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山药是最早被认知和使用的中药之一。产于河南、山西、河北、山东、浙江、福建、广西等省区,以河南产的怀山药为道地药材。其性平,味甘,具有补脾养胃,生津益肺,补肾涩精的功能。山药营养丰富,是食药兼用的佳品。本论文研究了山药中的三种活性成分：腺苷、b-谷甾醇、脱氢表雄酮(DHEA),并就不同产地山药中的三种活性成分的含量进行了测定,对山药质量进行了初步评价,论文包括三个部分：第一部分：不同产地山药中腺苷研究；第二部分：不同产地山药中b-谷甾醇研究；第三部分：不同产地山药中脱氢表雄酮( DHEA)研究。
　　第一部分：山药中腺苷研究
　　本实验对用加热回流的方法提取山药中的活性成分腺苷的工艺进行了研究。通过进行正交试验,确定最佳提取工艺为：每次加入乙醇 30mL,提取3次,每次3小时。高效液相色谱法检测腺苷的最佳条件为：流动相为磷酸盐缓冲液(ph=6.5)-甲醇(85：15)；检测波长为260nm；流速为1mL·min-1；柱温为25℃；进样量3μL。在此工艺和色谱条件下,对腺苷测定方法进行了方法学考察,其精密度、重复性、稳定性、回收率等均符合含量测定的要求。对 10批样品所含的腺苷成分进行了含量测定,结果表明不同产地的样品指标性成分的含量差异显著, 最高为0.104 0 mg·g-1(河南温县东平村),最低为 0.035 9 mg·g-1(河南武陟县赵庄)。
　　第二部分：山药中b-谷甾醇研究
　　用b-谷甾醇标准品,根据影响测定的色谱条件,配置不同浓度梯度的标准品溶液,筛选出最佳的色谱条件为：流动相为甲醇-水(99：1)；检测波长为204nm；流速为0.8ml·min-1；柱温为25℃；进样量10mL。用建立好的测定体系,设计单因素试验,对山药 b-谷甾醇的提取工艺进行优化,得到最佳提取工艺：料液比3：80,静置1h,超声时间60min。本次试验检测了10批不同产地的山药品种b-谷甾醇的含量,结果表明不同产地的山药品种间的 b-谷甾醇含量有显著差异,b-谷甾醇含量最高的品种为河南武陟县老崔庄,其b-谷甾醇含量为0.406 9 mg·g-1,b-谷甾醇含量最低的品种为广西山药,其b-谷甾醇含量为0.172 7 mg·g-1。
　　第三部分：山药中脱氢表雄酮(DHEA)研究本实验结合前人对甘薯中脱氢表雄酮提取纯化的经验,通过超声、萃取、除杂等工序的单因子试验、正交试验,从山药中得到活性成分DHEA。DHEA提纯的最佳参数为：料液比1：5,超声1h,加二氯甲烷萃取3次,加水萃取4次,去水层,合并萃取液,蒸干,色谱甲醇定容, HPLC定性,定量测定,具有方法简便,回收率高等优点,对于天然产物活性成分DHEA的开发利用以及山药的深加工,具有很好的参考价值和开发应用前景,也为不同品种的山药的质量控制提供了新的依据。高效液相色谱法检测 DHEA的最佳条件为：流动相甲醇：水=85：15；检测波长204nm；柱温25℃；流速0.8 ml/min。对10批样品所含的DHEA成分进行了含量测定,结果表明不同产地的样品指标性成分的含量差异显著, DHEA 含量最高的品种为河南武陟县老崔庄,其 DHEA 含量为0.478 2mg·10g-1,DHEA含量最低的品种为广西山药,其DHEA含量为0.045 1 mg·10g-1。

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作者
岳易恒;
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作者单位

河南中医药大学;

河南中医学院;

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授予单位河南中医药大学;河南中医学院;
学科中药学
授予学位硕士
导师姓名李军;
年度 2011
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类药理学;中药学;
关键词
山药; HPLC; 腺苷; β-谷甾醇; DHEA;

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