光谱法研究三种头孢类药物与胰蛋白酶、牛转铁蛋白之间的相互作用

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近年来，人类疾病的发生率逐年增加，各种药物在生活中也起到了不容忽视的作用，为了更好的了解药物的药理、药效和靶向运输，药物与蛋白相互作用的研究课题已成为人们关注的重点。本文以胰蛋白酶和牛转铁蛋白为载体蛋白，用多种方法研究了硫酸头孢匹罗、头孢哌酮钠、头孢尼西钠与蛋白的相互作用。
　　本研究分为五个部分：第一章阐述了几种研究蛋白与小分子药物相互作用的常用方法，并对胰蛋白酶和转铁蛋白进行了简单的概述。对立题思路、研究内容以及药物与蛋白相互作用的展望进行了简单的介绍。第二章用多种光谱法和分子对接法研究了胰蛋白酶和硫酸头孢匹罗之间的相互作用。结果表明，硫酸头孢匹罗使胰蛋白酶发生荧光猝灭，猝灭机理为静态猝灭，结合位点数接近于1。猝灭曲线表明色氨酸残基和酪氨酸残基都参加了反应。同步荧光光谱法进一步表明，二者主要的结合位点更接近于色氨酸残基。对热力学参数的计算表明，二者之间主要作用力为静电引力，分子对接表明二者之间的作用力为静电引力，其中还有氢键作用。胰蛋白酶与硫酸头孢匹罗之间的距离小于7nm，表明从胰蛋白酶到硫酸头孢匹罗的能量转移为非辐射能量转移。荧光光谱法对Hill系数的研究表明，硫酸头孢匹罗与胰蛋白酶之间存在负协同作用。第三章利用荧光光谱法，同步荧光光谱法和紫外吸收光谱法研究了硫酸头孢匹罗和牛转铁蛋白之间的相互作用。测定了二者之间的猝灭常数、结合常数、结合位点等。通过对热力学参数的计算，确定了硫酸头孢匹罗和牛转铁蛋白之间的主要作用力类型以静电引力为主。通过对Hill系数的计算，得出了硫酸头孢匹罗和牛转铁蛋白之间的协同作用为负协同作用。第四章通过荧光猝灭法和同步荧光光谱法对头孢哌酮钠与牛转铁蛋白的相互作用机理进行了研究。结果表明，两种方法用相同的公式计算得到的二者的猝灭机理、结合位点，相互作用力以及协同作用基本一致。并且通过对Δλ=60nm和λex=295 nm的数据进行比较，得出同步荧光光谱法较之于传统荧光光谱法有更高的灵敏度和准确度。因此，同步荧光光谱法极大地丰富了小分子配体与蛋白之间相互作用机理的研究方法。第五章实验在pH=7.4缓冲溶液条件下，研究了不同温度下头孢尼西钠与牛转铁蛋白的相互作用。结果表明，牛转铁蛋白-头孢尼西钠体系中，主要的作用方式为生成了新的复合物的静态猝灭，二者的结合位点数为1。由热力学参数可知头孢尼西钠与牛转铁蛋白主要通过静电引力结合。紫外吸收光谱法和同步荧光光谱法都证明了头孢尼西钠使得牛转铁蛋白氨基酸极性增大，疏水性减小。

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作者
段韶彤;
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作者单位

河北大学;

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授予单位河北大学;
学科分析化学
授予学位硕士
导师姓名刘保生;
年度 2017
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类抗生素;生化药理学;
关键词
抗菌药物; 头孢菌素; 转铁蛋白; 光谱分析;

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