皮肤模型的构建及在检测药物化妆品中的应用

声明

摘要

本文所用缩略词及中文对照

1 引言

1．1 研究内容及意义

1．2 技术路线

2 文献综述

2．1 人工皮肤检测模型的建立

2．2 国内外皮肤模型研究进展

2．2．1 EPISKINTM SIT

2．2．2 EpiDermTM SIT

2．2．3 SkinEthicTM SIT

2．2．4 应用评价

2．3 皮肤检测模型应用评价

2．4 总结

3 材料和方法

3．1 材料

3．1．1 试验材料

3．1．2 生化试剂及试剂盒

3．1．3 受试物

3．1．4 动物品种

3．1．5 主要仪器

3．1．6 常用试剂配制方法

3．2 试验方法

3．2．1 成纤维细胞的分离培养

3．2．2 角质细胞分离培养

3．2．3 胶原支架制备

3．2．4 Transwell气液培养

3．2．4 皮肤模型鉴定

3．2．5 皮肤模型检测

3．2．7 动物急性经皮试验

4 结果与分析

4．1 构建了2株成纤维细胞系

4．1．1 细胞形态的显微观察

4．1．2 成纤维细胞HE染色观察

4．1．3 成纤维细胞免疫组化鉴定结果

4．1．4 MTT结果

4．1．5 成纤维细胞凋亡检测结果

4．2 成功分离培养角质细胞

4．2．1 角质细胞形态学观察结果

4．2．2 角质细胞HE染色结果

4．2．3 角质细胞免疫组化鉴定结果

4．2．4 MTT结果

4．2．5 角质细胞生长周期检测结果

4．2．6 共培养结果

4．3 胶原支架制备成功

4．3．1 Transwell气液培养

4．4 皮肤模型切片鉴定结果

4．4．1 HE染色结果

4．4．2 免疫组化鉴定结果

4．5 皮肤模型检测结果

4．6 动物急性经皮试验结果

4．7 皮肤模型与动物经皮试验对比分析

5 讨论

5．1 成纤维细胞系的建立

5．2 胶原凝胶制备

5．3 皮肤模型验证

5．4 皮肤模型试验与动物试验比较

6 结论

参考文献

作者简历

致谢