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荧光分光光度法测定牛奶中三种抗生素残留

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1引言

1.1牛奶中抗生素残留现状

1.2牛奶中常见残留抗生素的种类及检测方法

1.2.1 β-内酰胺类抗生素及其检测方法

1.2.2四环素类抗生素及其检测方法

1.2.3氨基糖苷类抗生素及其检测方法

1.3荧光分析法在药物分析中的应用

1.3.1直接荧光分析法

1.3.2胶束增敏荧光分析法

1.3.3化学衍生荧光分析法

2碱解增敏荧光法测定牛奶中四环素残留

2.1试验部分

2.1.1主要仪器与试剂

2.1.2试验方法

2.1.3仪器测定条件

2.2结果与讨论

2.2.1四环素水解时间的选择

2.2.2表面活性剂种类对异四环素荧光增敏作用的影响

2.2.3 pH值对荧光强度的影响

2.2.4表面活性剂浓度对荧光强度的影响

2.2.5线性范围、检出限和精密度

2.2.6共存物质的干扰

2.2.7样品分析

3邻苯二甲醛衍生荧光法测定牛奶中苄青霉素残留的研究

3.1实验部分

3.1.1仪器与试剂

3.1.2实验方法

3.1.3仪器测定条件

3.2结果与讨论

3.2.1苄青霉素水解时间的选择

3.2.2常规过甲酸氧化处理对衍生反应的影响

3.2.3 pH对衍生反应的影响

3.2.4 OPA衍生试剂用量与衍生反应时间的选择

3.2.5线性关系与检出限

3.2.6共存物质的干扰

3.2.7样品分析

4荧光胺衍生荧光法测定牛奶中新霉素残留

4.1实验部分

4.1.1仪器与试剂

4.1.2实验方法

4.1.3仪器测定条件

4.2结果与讨论

4.2.1新霉素衍生产物荧光激发、发射波长的确定

4.2.2 pH对衍生反应的影响

4.2.3反应时间及衍生产物的稳定性

4.2.4荧光胺和新霉素的配比

4.2.5有机溶剂的影响

4.2.6三氯乙酸蛋白沉淀剂的选择

4.2.7线性范围、检出限及精密度

4.2.8共存物质的干扰

4.2.9样品分析

5结论

参考文献

在读期间发表的学术论文

作者简历

致谢

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摘要

抗生素广泛用于兽医临床治疗及饲料药物添加剂,然而不规范用药会引起畜禽产品尤其是泌乳动物乳汁中的药物残留,对人类的健康构成潜在危害。因此,建立一类准确、简便、高灵敏度的抗生素药物生物残留的检测方法非常必要。荧光分析法是一种灵敏度高、选择性好、简便快速的分子发射光谱分析法,近年来发展迅速。本文研究了牛奶三种抗生素残留的荧光分析法。 本文建立了荧光分光光度法测定牛奶中四环素残留的新方法。四环素在0.10mol/L的NaOH溶液中反应,生成强荧光降解产物异四环素,在碱性条件下加入十六烷基三甲基溴化铵后,荧光强度增大两倍左右。线性动态范围为50μg/L~2500μg/L;检出限2.06μg/L;样品的加标回收率为84.56%~90.06%。本法成功的用于牛奶中四环素的残留测定。 青霉素是一种高效广谱抗生素类药物,广泛用于预防及治疗奶牛疾病。苄青霉素在酸性条件下的水解产物之一是青霉胺,与邻苯二甲醛衍生后可生成具有强荧光的1。硫代2-烷基异吲哚衍生物,据此建立了荧光分光光度法测定苄青霉素的新方法。在水解时间60min、pH10.0、衍生试剂用量40gL和15min反应时间下,线性动态范围为2.0~5.0x102μg/L,检出限为1.33μg/L,样品的平均加标回收率为89.10%,方法可满足国标对牛奶中苄青霉素残留的限量要求。 建立了荧光胺衍生荧光分光光度法测定牛奶中新霉素残留的新方法。实验采用三氯乙酸沉淀牛奶蛋白,并对影响衍生反应的缓冲液pH、有机溶剂的种类、衍生试剂用量进行了优化。在以丙酮为有机溶剂、pH7.2、衍生试剂用量150μL条件下,线性动态范围为0.1~2.5 mg/L,检出限为5.2×10-2mg/L,样品的平均加标回收率为90.88%,方法可满足国标对牛奶中新霉素残留的限量要求。

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