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1引言
1.1研究的目的与意义
1.2哺乳动物胚胎体外生产技术研究概况
1.3卵母细胞体外成熟
1.3.1卵母细胞体外成熟和调节机制
1.3.2卵母细胞体外成熟培养方法
1.4精子获能与体外受精
1.4.1精子获能的原理
1.4.2精子获能与体外受精方法
1.5早期胚胎体外培养
1.5.1早期胚胎发育机理
1.5.2早期胚胎体外培养方法
1.6存在问题与研究方向
2材料与方法
2.1试验材料
2.1.1试验主要仪器及设备
2.1.2主要试剂
2.1.3主要操作液及配制
2.1.4试验材料来源
2.2试验方法
2.2.1羊卵巢的采集与运输
2.2.2卵母细胞的采集
2.2.3卵母细胞的体外成熟
2.2.4卵母细胞成熟情况评定
2.2.5精子的制备
2.2.6体外受精
2.2.7孤雌激活
2.2.8早期胚胎体外培养
2.2.9胚胎移植
2.3实验设计
2.3.1绵羊体外受精影响因素研究试验设计
2.3.2山羊体外受精影响因素研究试验设计
2.4统计分析
3试验结果
3.1第一部分绵羊体外受精影响因素的研究试验结果
3.1.1不同IVF体系在绵羊体外受精上的效果
3.1.2绵羊卵母细胞体外成熟的研究
3.1.3绵羊卵巢运输条件和采卵方法对体外受精效果的影响
3.1.4绵羊体外受精和早期胚胎的体外发育
3.2第二部分山羊体外受精影响因素的研究试验结果
3.2.1山羊卵母细胞体外成熟的研究
3.2.2山羊卵母细胞体外受精和早期胚胎体外培养的研究
3.2.3不同气相条件对山羊IVM、IVF和IVC的影响
3.2.4胚胎移植试验结果
4讨论
4.1不同体外受精体系在绵、山羊体外受精研究上的效果
4.2影响绵、山羊卵母细胞体外成熟的因素
4.2.1不同成熟培养时间对绵、山羊体外受精效果的影响
4.2.2不同蛋白添加成分对绵羊体外成熟、体外受精效果的影响
4.2.3不同激素组合对绵、山羊体外成熟、体外受精效果的影响
4.2.4 EAA和NEAA在山羊卵母细胞成熟中的作用
4.2.5绵、山羊体外成熟卵母细胞成熟效果评定
4.3绵羊卵巢运输条件和采卵方法对体外受精效果的影响
4.3.1卵巢运输保存温度的影响
4.3.2不同采卵方法的采卵效果
4.3.3不同采卵方法对绵羊卵母细胞发育能力的影响
4.4影响绵、山羊体外受精效果的因素
4.4.1不同受精液种类对绵、山羊体外受精效果的影响
4.4.2不同精子处理方法对绵羊体外受精效果的影响
4.4.3受精液中添加NEAA可能具有提高山羊受精卵裂率和胚胎发育率的作用
4.5影响绵、山羊早期胚胎体外发育的因素
4.5.1换液操作对绵羊胚胎体外发育的影响
4.5.2不同发育培养液对山羊胚胎发育的影响
4.5.3改良发育液和序贯培养对山羊体外受精卵发育的影响
4.5.4卵丘细胞单层共培养对山羊早期胚胎发育的影响
4.6负压气相条件对山羊体外受精效果的影响
4.6.1负压气相条件对山羊体外成熟的影响
4.6.2负压气相条件对山羊体外受精的影响
4.6.3负压气相条件对山羊IVF胚发育的影响
5结论
参考文献
附录
在读期间发表学术论文
作者简历
致谢
