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摘要
Abstract
植物转基因方法、存在问题及对策(文献综述)
1植物转基因方法概述
1.1载体转化系统
1.1.1根癌农杆菌Ti质粒介导的基因转化
1.1.2发根农杆菌Ri质粒载体基因转化
1.1.3植物病毒载体介导基因转化
1.2种质转化系统
1.2.1花粉管导入法
1.2.2生殖细胞浸泡法
1.2.3胚囊、子房注射法
1.3直接转化系统
1.3.1化学诱导DNA直接转化
1.3.2物理法诱导DNA直接转化
1.4植物基因转化系统的选择策略
1.4.1基因转化系统的评价条件
1.4.2植物基因转化系统的选择原则
2植物遗传转化中出现的问题和对策
2.1组织培养中的体细胞变异
2.2转基因沉默
2.2.1转基因沉默的机理
2.2.2克服转基因沉默的策略
2.3非目的片段的去除
2.3.1共转化系统
2.3.2位点特异性重组系统
2.3.3多—自动转化系统
3结束语
引言
材料与方法
1材料
1.1植物材料
1.2质粒和菌种
1.3试剂
2方法
2.1番茄rbcS3A和rbcS3C基因启动子的扩增和序列鉴定
2.2克隆载体和双元载体的构建
2.3 rbcS3A-gusA和rbcS3C-gusA转基因植株的制备及鉴定
2.4转基因悬浮系的建立
结果与分析
1 rbcS3A和rbcS3C启动子的扩增和序列测定
2双元载体的构建及农杆菌转化
2.1双元载体pBI-rbcS3A-gusA和pBI-rbcS3C-gusA的构建及鉴定
2.2双元载体转化农杆菌LBA4404
3转pBI-rbcS3A-gusA和pBI-rbcS3C-gusA番茄的制备及鉴定
3.1番茄的遗传转化
3.2番茄转基因植株的鉴定——GUS组织染色
4转pBI-rbcS3A-gusA和pBI-rbcS3C-gusA烟草的制备及鉴定
4.1烟草的遗传转化
4.2转基因烟草的鉴定
5转基因烟草悬浮系的建立
讨论
1.载体构建及农杆菌转化
2.番茄的遗传转化
3.烟草的遗传转化和鉴定
4.转基因烟草悬浮系的建立
5.本实验的目的和意义
参考文献
致谢
个人简历
