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钼致雄鼠生殖损伤机制研究及槲皮素对其的保护作用

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符号表

第1章 文献综述

1.1 环境污染物对生殖系统的影响

1.2 钼元素的研究概况

1.3 钼毒性的缓解

1.4 槲皮素的研究概况

1.5 本课题研究的内容、目的及意义

第2章 钼对小鼠精子质量和睾丸氧化程度的影响

2.1 材料与方法

2.2 结果

2.3 讨论

2.4 小结

第3章 钼对雄鼠血液和睾丸中其他元素的影响

3.1 材料与方法

3.2 结果

3.3 讨论

3.4 小结

第4章 钼对雄鼠睾丸和附睾形态结构的影响

4.1 材料与方法

4.2 结果

4.3 讨论

4.4 小结

第5章 槲皮素对钼致雄性小鼠生殖毒性的缓解作用

5.1 材料与方法

5.2 结果

5.3 讨论

5.4 小结

第6章 结 论

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间的研究成果

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摘要

本试验主要研究槲皮素（Que）对钼（Mo）致雄性小鼠生殖功能损伤的缓解作用。通过称量计算小鼠附睾系数，显微镜检测精子的3个参数（精子密度、活力和畸形率），试剂盒检测睾丸组织的生化指标（MDA含量、SOD和GSH-Px活性），测量血液和睾丸中4种微量元素（铜、锌、铁和锰）含量的变化，观察睾丸和附睾形态结构的变化等，探索高钼对雄鼠生殖功能的损伤作用及可能机制，获得缓解钼诱导雄性动物生殖功能损伤的有效药物及其较佳剂量。试验分为两个部分：
　　一、钼对小鼠生殖能力的损伤作用和机制的探索
　　旨在获得引起雄性小鼠生殖能力明显降低的最小钼浓度及中毒可能机制。90只健康性成熟ICR小鼠被随机分为6组。分别让其饮用钼浓度为0、12.5、25、50、100、200 mg/L的蒸馏水2周，脊柱脱臼法致死小鼠，检测各个参数。结果显示：不同浓度钼处理均可引起各个检测指标的变化，当浓度为100 mg/L时，影响作用开始明显。与对照组相比，100 mg/LMo组小鼠附睾系数显著下降(P＜0.01)；铜含量显著下降(P＜0.05)，锌和锰含量上升，差异分别为显著和极显著，铁含量基本不变；精子密度和活力显著下降(P＜0.05)，畸形率显著上升(P＜0.01)；高钼还可以增加睾丸组织的氧化压力，使MDA含量上升，差异显著，SOD和GSH-Px活性下降，差异分别为显著和极显著；100 mg/LMo还能使睾丸曲细精管内各级生殖细胞散乱，伸长型精子细胞减少，各级生精细胞线粒体空泡化，嵴消失，内质网扩张，附睾上皮细胞脱落，主细胞细胞内空泡化，线粒体空泡化，游离面静纤毛散乱，粗细不均匀，管腔中精子密度降低，精子顶体膜皱起，线粒体肿胀。还发现，适量钼（25 mg/L）可以显著降低睾丸的氧化损伤程度，对小鼠的生殖功能起促进作用。100 mg/L可以作为研究钼对小鼠生殖功能产生明显毒性作用的剂量。
　　二、槲皮素对钼生殖毒性的缓解作用
　　旨在研究槲皮素对钼诱导的雄鼠生殖参数降低的保护作用。将90只健康性成熟ICR小鼠随机分为6组，分别按照water＋Oil，100 mg/L Mo＋Oil，100 mg/L Mo＋1mg/mL Que，100mg/LMo＋3mg/mLQue，100mg/LMo＋6mg/mLQue，100 mg/L Mo＋9 mg/mL Que处理2周。检测各个参数表明，6 mg/mL Que处理能有效改善雄性小鼠附睾系数、生殖参数及其睾丸和附睾的形态结构，其余浓度槲皮素治疗效果不明显或者无治疗作用；补充6 mg/mL Que后，睾丸中SOD和GSH-Px活性显著上升(P＜0.01)，能有效抵抗睾丸的氧化压力；不同剂量槲皮素均能导致睾丸中微量元素含量的变化，而6 mg/mL时，微量元素的含量有利于睾丸内抗氧化酶的功能发挥。结论：槲皮素对钼致雄性小鼠睾丸氧化损伤和精液质量下降有一定的缓解作用，较佳剂量是6 mg/mL。
　　综上所述，适量浓度的钼可以提高雄性小鼠的生殖功能，而高剂量钼则会明显引起睾丸的氧化损伤，降低精液质量。适量槲皮素能显著降低睾丸的脂质过氧化损伤，保护睾丸和附睾的形态功能，维护小鼠正常的生殖功能，表明槲皮素可以有效对抗钼的生殖毒性。

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