两种植物雌激素成分对A375细胞黑素合成作用的机制研究

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目的：研究两种补骨脂来源的植物雌激素成分补骨脂二氢黄酮甲醚、补骨脂异黄酮对人黑素瘤细胞（A375细胞）生物学特性的影响，及其对黑素细胞ER-MAPK信号通路的调节作用，阐明植物雌激素成分干预黑素合成的潜在作用机制，为合理利用中药植物雌激素防治黄褐斑等皮肤色素沉着类疾病提供理论依据。
　　方法：将补骨脂二氢黄酮甲醚和补骨脂异黄酮，以及雌激素受体阻断剂ICI182780、JNK抑制剂SP600125分别作用于A375细胞，采用MTT法、NaOH裂解法、多巴氧化法方法检测细胞增殖率、黑素合成量和酪氨酸酶（TYR）的活性，分析两种植物雌激素对黑素合成的干预作用；用 RT-PCR和Western bloting法测定控制黑素合成的关键酶TYR、TRP-1和TRP-2以及ER信号通路中关键蛋白激酶ERK1/2和JNK的mRNA和蛋白的表达，探讨两种植物雌激素干预黑素分泌的分子机制。
　　结果：高剂量（100μmol?L-1、10μmol?L-1）的补骨脂二氢黄酮甲醚和补骨脂异黄酮显著抑制 A375细胞生长（P﹤0.05），对细胞有毒性作用，不适合进行下一步研究；中低剂量（1μmol?L-1、10-1μmol?L-1、10-2μmol?L-1）的补骨脂二氢黄酮甲醚、补骨脂异黄酮对细胞生长无明显影响，且均可不同程度抑制 A375细胞黑素合成（P﹤0.05）及TYR活性（P﹤0.05）；浓度为1μmol?L-1的补骨脂二氢黄酮甲醚和补骨脂异黄酮均不同程度抑制 TRP-1/2和TYRmRNA及蛋白的表达（P﹤0.05），并且抑制 ERK1、ERK2、JNK2 mRNA及蛋白的表达（P﹤0.05）；而这种抑制作用能被ER抑制剂ICI182780及JNK抑制剂SP600125所逆转（P﹤0.05）。
　　结论：补骨脂二氢黄酮甲醚和补骨脂异黄酮能够抑制 A375细胞黑素合成，而抑制黑素合成的机制可能是植物雌激素通过与 ER结合后，启动第二信使迅速激活ER-MAPK信号通路，降低ERK、JNK的表达，从而抑制了TYR活性和表达，最终达到抑制黑素合成的作用。

著录项

作者
张明磊;
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作者单位

佳木斯大学;

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授予单位佳木斯大学;
学科药物分析
授予学位硕士
导师姓名张宁;
年度 2015
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原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类中药实验药理;
关键词
皮肤色斑; 中药治疗; 植物激素; 实验药理;

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