生殖支原体培养液的研制及临床应用

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目的: 生殖支原体可以引起尿道炎、宫颈炎，与慢性非细菌性前列腺炎、不孕不育症有一定的相关性，是一种正在危害人类健康的病原菌。生殖支原体通常采用SP4培养基培养或PCR方法进行检测，由于生殖支原体生长缓慢，用SP4培养基培养一般需要1—3个月才能出结果，严重贻误临床诊治；PCR法作为分子生物学的一次重大革命性技术，在生殖支原体的实验室诊断方面得到了充分应用，但PCR技术要求高，需要相应设备及场地，一般医院难以满足，这就大大限制了生殖支原体检测在临床的广泛开展，当前临床急需一种能够方便、快捷的生殖支原体检测试剂盒。本课题借助传统的SP4培养液为基础，参考文献并结合多年支原体研究经验，开发出一种可以快速培养生殖支原体的培养液，从而可以及时辅助临床进行生殖支原体的检测。
　　方法: 借助传统SP4培养液配方，对其各组分进行优化试验，在此基础上设计灵敏度优化方案和特异性优化方案，结合正交实验，筛选出生殖支原体培养试剂的最佳配方；然后用临床分离的生殖支原体菌株和特异性标准菌株进行灵敏度与特异性的初步验证；最后，以荧光定量PCR试剂盒为对照，利用优化后的培养液对872例临床生殖支原体感染疑似患者标本进行检测分析，评价该培养液的性能。
　　结果: 通过动物血清、蛋白胨、酵母粉等组分的正交设计，优化了传统SP4培养液，再通过添加调整无机盐、维生素、氨基酸等生长因子，使培养液灵敏度达到最佳；通过添加多种抑菌剂，从而可以有效抑制非生殖支原体微生物，保持培养液的特异性；利用临床分离的生殖支原体菌株对其进行评价，与传统殖支原体培养试剂相比，培养时间有显著性差异，P＜0.05；特异性标准菌株验证无干扰，特异性强；利用临床生殖支原体疑似患者标本对其进行评价，与生殖支原体荧光定量 PCR试剂盒检测结果对比，无显著性差异，P>0.05。
　　结论: 自主研制的生殖支原体培养试剂将传统生殖支原体的培养时间由1～3个月缩短到5～7d，临床检测结果与PCR试剂盒无显著性差异，可用于临床检测。

著录项

作者
郑业焕;
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作者单位

郑州大学;

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授予单位郑州大学;
学科生物工程
授予学位硕士
导师姓名朱大恒;
年度 2015
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类尿道疾病;
关键词
生殖支原体; 尿道炎; 培养液; 相关性; 临床检测;

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