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CRT、IAP及TSP-1在人稽留流产蜕膜组织中的表达及意义

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摘要

英文缩略词(Abbreviations)

前言

材料与方法

1 材料

2 方法

3 统计学分析

结果

1 一般情况比较

2 人工流产术日血清β-hCG及妊娠囊平均径线测定结果

3 病理结果

4 免疫组织化学部分

讨论

1 血清β-hCG及妊娠囊平均径线在稽留流产诊断中的意义

2 CRT、IAP及TSP-1在稽留流产与正常妊娠蜕膜中表达差异

3 蜕膜CRT、CD47及TSP-1的表达异常与稽留流产的关系

结论

参考文献

综述

个人简历

攻读硕士学位期间发表的文章

致谢

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摘要

背景：
　　 辅助生殖技术助（assisted reproductive technology，ART）经历了三十多年的发展，已成为当今社会不孕症患者获得后代的重要治疗途径，临床妊娠率稳定在50％左右。但文献中报道ART助孕后早期流产发生率高达18％-30％，严重影响了继续妊娠率，而自然妊娠后早期流产率约为12％-15％。
　　 稽留流产(missed abortion，MA)大多数发生于妊娠12周以内，是早期流产的常见的病理妊娠类型。其发病因素复杂，涉及胚胎染色体异常，母体生殖道感染、内分泌异常，母-胎交界免疫失衡，细胞凋亡异常，子宫胎盘循环障碍，环境因素等众多方面。目前对早期妊娠丢失的大量研究集中于胚胎早期发育的异常及母胎免疫耐受异常。我中心早期研究提示，ART助孕后及自然妊娠稽留流产胚胎染色体异常率无显著性差异，那么是否存在其他影响因素导致了ART助孕后稽留流产率增高呢？因此，研究蜕膜的生长、退化和调控，对于明确胚胎着床机制和生育调节都有极为重要的意义。
　　 钙网蛋白(calreticulin，CRT)是内质网的钙离子结合蛋白之一，可通过不同的亚细胞定位发挥相应的生物学效应，协助蛋白质的折叠、加工，调控细胞内钙离子稳态与内质网钙离子储存;参与抗原提呈、抑制血管生成、细胞凋亡等过程。整合素相关蛋白（integrin-associated protein，IAP）通过抑制性信号调节蛋白结合，表达抑制性调节信号，降低巨噬细胞的吞噬活性。凝血酶敏感蛋白(thrombospondin-1，TSP-1)可介导细胞间及细胞间质间的细胞粘附、激活TGF-β、抑制血管内皮细胞增殖、介导细胞凋亡、参与免疫耐受。那么，在蜕膜组织中是否也存在类似的蛋白表达呢？CRT、IAP及TSP-1的表达，在妊娠的建立及维持的过程中的作用极少被提及。
　　 目的：
　　 通过测定CRT、IAP及TSP-1在排除胚胎染色体异常因素后稽留流产患者及正常妊娠患者蜕膜组织的表达，比较正常早期妊娠与早期稽留流产患者蜕膜组织中CRT、IAP及TSP-1的表达的差异，初步探讨CRT、IAP及TSP-1表达异常与稽留流产发病的相关性，为研究稽留流产发病的机制及提高ART技术妊娠率提供临床及科研提供理论依据。
　　 材料与方法：
　　 选取2012年7月至2013年1月期间于郑州大学第一附属医院54例行清宫术的稽留流产患者，其中ART助孕后稽留流产组:于本院生殖中心接受ART助孕后稽留流产患者27例，自然妊娠后稽留流产组:自然妊娠后稽留流产患者27例，两组均排除胚胎染色体异常。另选取同时期妇产科门诊因个人原因要求实施人工流产术患者30例作为对照组。电化学发光法检测人工流产术前患者血清β-hCG的含量，阴道二维超声测量妊娠囊及胎芽头臀长度。收集以上84例患者离体蜕膜组织送病理检查的同时，应用免疫组织化学的方法检测CRT、IAP及TSP-1在蜕膜组织中的表达情况。采用SPSS12.0统计学软件进行统计学分析。
　　 结果：
　　 1.ART后稽留流产组、自然妊娠后稽留流产组和对照组患者比较，三组间年龄，体质量指数，妊娠天数，差异无统计学意义(P＞0.05)，人工流产手术日助孕后稽留流产组、自然妊娠后稽留流产组妊娠囊平均径线值及血清β-hCG水平均低于对照组水平(分别F=32.312，P=0.000;F=56.606，P=0.000)，差异具有显著性。
　　 2.CRT、IAP及TSP-1在蜕膜细胞中均呈阳性表达，均位于细胞浆及胞膜。ART稽留流产组和自然妊娠稽留流产组CRT、TSP-1的表达均高于对照组，IAP的表达均低于对照组，差异有统计学意义(分别F=115.580，P=0.000;F=1255.696，P=0.000;F=604.99，P=0.000)，而ART稽留流产组与自然妊娠稽留流产组蜕膜组织中三种蛋白的表达差异无统计学意义(P＞0.05)。
　　 3.ART后稽留流产组、自然妊娠后稽留流产组蜕膜组织中CRT与IAP表达呈负相关关系（分别r=-0.647，P=0.000;r=-0.474，P=0.013）。正常妊娠患者蜕膜组织中CRT与IAP表达呈正相关关系(r=0.328，P=0.028)。
　　 结论：
　　 1.稽留流产患者可根据妊娠早期血清β-hCG水平及妊娠囊平均径线及早进行诊断和妊娠的终止。
　　 2.ART助孕后及正常妊娠后稽留流产患者蜕膜组织中CRT、TSP-1表达较正常妊娠患者蜕膜中增加，IAP表达较正常妊娠患者蜕膜中减少，三种蛋白表达水平异常可能参与了稽留流产的发生。
　　 3.稽留流产患者蜕膜组织中CRT与IAP含量存在负相关关系，可能存在某种机制调节二者在蜕膜组织中的表达，共同作用母-胎界面上母体细胞稳定的维持。

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