盾叶薯蓣环阿屯醇合酶全长基因克隆和启动子功能验证

代理获取

页面导航

摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

盾叶薯蓣(Dioscoreazingiberensis Wright)是我国特有的重要药用植物,其含有的薯蓣皂甙元是合成甾体激素药物的重要原料。环阿屯醇合酶(cycloartenolsynthase,CAS)是薯蓣皂甙元生物合成途径中的第一个关键酶。本研究以盾叶薯蓣为材料,分别克隆CAS全长基因及其上游调控序列,进行了CAS全长分析和上游序列启动功能分析,研究结果如下:
　　以基因组DNA为模板,利用染色体步行和长距离PCR方法首次克隆了盾叶薯蓣CAS全长基因。序列分析比较结果表明,盾叶薯蓣CAS全长基因为7192bp,由18个外显子和17个内含子组成。外显子总长为2280 bp,编码759个氨基酸,最长的外显子为198 bp,最短的为47 bp:内含子总长4912 bp,最长的内含子为1551 bp,最短的为68 bp。Southern blot杂交分析表明,CAS基因在盾叶薯蓣基因组中为单拷贝。
　　在已知CAS全长基因序列的基础上,经染色体步行法获得了CAS基因起始密码子5'上游1457 bp的特异性DNA序列,命名为pCAS9I。进行序列分析表明:该序列含有启动子的基本功能元件CAAT-box和TATA-box、启动子的其它功能元件,如I-box、GAG-motif、GATA-motif、TCT-motif、HSE、GARE-motif、LTR和TC-rich等,还包含一个543 bp的内含子。
　　用pCAS9I置换表达载体pCAMBIA1305.1-NPTⅡ上报告基因gusPlus的CaMV35S启动子,通过根癌农杆菌介导转化烟草叶片和盾叶薯蓣愈伤组织。GUS活性分析表明,pCAS9I成功地启动了gusPlus基因在烟草与盾叶薯蓣的愈伤组织,以及烟草幼苗中表达。

著录项

作者
涂碧梦;
展开▼
作者单位

湖北大学;

展开▼
授予单位湖北大学;
学科生物化学与分子生物学
授予学位硕士
导师姓名陈永勤;
年度 2010
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类中药实验药理;
关键词
盾叶薯蓣; 环阿屯醇合酶基因; 基因克隆; 启动子;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. 盾叶薯蓣环阿屯醇合酶全长基因的克隆与分析 [J] . 涂碧梦 ,陈永勤 ,杨之帆 . 西北植物学报 . 2010,第001期
2. 盾叶薯蓣环阿屯醇合酶基因克隆与表达 [J] . 陈迪 ,陈永勤 ,杨之帆 . 西北植物学报 . 2009,第002期
3. 盾叶薯蓣3-羟基,3-甲基戊二单酰辅酶A还原酶和环阿屯醇合成酶基因克隆及序列分析 [J] . 秦玉芝 ,邓克勤 ,林建中 . 湖南大学学报（自然科学版） . 2007,第007期
4. 丹参环阿屯醇合酶基因克隆及表达分析 [J] . 李珍 ,王东浩 ,姚伟 . 西北植物学报 . 2013,第007期
5. 杜仲2-甲基-D-赤藓糖醇-2,4-环焦磷酸合酶基因全长cDNA克隆与序列分析 [J] . 刘攀峰 ,乌云塔娜 ,杜兰英 . 浙江农林大学学报 . 2014,第003期
6. 苦荞黄酮醇合酶及其启动子的功能研究 [C] . 赵学荣 ,李成磊 ,孙家宜 . 全国农业生物化学与分子生物学第十六届学术研讨会 . 2017
7. 盾叶薯蓣环阿屯醇合成酶基因的克隆与表达 [A] . 陈迪 . 2007

相关主题

盾叶薯蓣环阿屯醇合酶全长基因克隆和启动子功能验证

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅