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黑果茶藨果渣中花色苷的分离纯化工艺研究

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目录

1绪论

1.1 黑果茶藨的概述

1.1.1黑果茶藨的形态特征

1.1.2黑果茶藨的成分及营养价值

1.1.3黑果茶藨的药用价值

1.1.4黑果茶藨的应用

1.2花色苷的概述

1.2.1花色苷的结构和性质

1.2.2花色苷的生理活性功能

1.2.3影响花色苷稳定性的因素

1.2.4花色苷抗氧化性研究

1.2.5应用中花色苷存在的问题

1.3花色苷的提取方法

1.3.1有机溶剂提取花色苷

1.3.2超临界流体提取花色苷

1.3.3超声辅助提取花色苷

1.3.4匀浆法提取花色苷

1.3.5微波辅助提取花色苷

1.4花色苷的纯化方法

1.4.1薄层层析(TLC)

1.4.2柱色谱

1.4.3高速逆流色谱法(HSCCC)

1.5研究的目的及意义

2黑果茶藨果渣中花色苷的含量测定方法的建立

2.1实验材料

2.1.1原料及标品

2.1.2试剂

2.1.3仪器

2.2 HPLC分析条件的确定

2.2.1对照品储备液配制

2.2.2检测波长的确定

2.2.3流动相的选择

2.2.4标准曲线的绘制

2.2.5方法的精密度考察

2.2.6重现性考察

2.2.7供试品的稳定性考察

2.3本章小结

3匀浆-微波辅助提取黑果茶藨果渣中花色苷

3.1试剂和材料

3.1.1单因素实验

3.1.2Plackett-Burman design(PBD)实验设计

3.1.3Box-Behnken design(BBD)法实验优化

3.2结果与讨论

3.2.1单因素实验

3.2.2 Plackett-Burman design(PBD)

3.2.3 Box-Behnken design(BBD)

3.3本章小结

4高速逆流色谱法(HSCCC) 分离黑果茶藨果渣中花色苷

4.1实验仪器、材料及试剂

4.1.1仪器设备

4.1.2材料及试剂

4.2实验方法

4.2.1溶剂体系的选择

4.2.2高速逆流色谱法分离纯化条件优化

4.3结果与讨论

4.3.1溶剂系统

4.3.2 HSCCC分离条件优化

4.3.3 HSCCC法进一步分离鉴定黑果茶藨果渣中花色苷

4.4本章小结

结论

参考文献

攻读学位期间发表的学术论文

致谢

声明

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摘要

日常生活中大部分植物的花和叶都会呈现各种各样鲜艳的颜色,这其实正是天然色素花色苷存在的原因,广泛分布于植物的根茎叶等大部分组织中,是一类具有苯并吡喃结构的黄酮类物质,由六种花色素和多种单糖或二糖组成多种结构形式;而且花色苷可以对人体起到抗氧化、清除自由基以及抗癌的作用,是人类生活中不可或缺的保健品,同时黑果茶藨中含有大量的花色苷。近些年由于研究工作不断深入,关于花色苷的研究成果得到来自医药界、日用化工等领域认可。尽管如此,但是在花色苷开发过程中受设备,技术水平及原料来源和储备方式不完善以及花色苷自身的不稳定等影响,在对花色苷开发研究中未取得突破性进展。因此在对黑果茶藨的提取分离纯化上尚有较大的提升空间。
  本文以黑果茶藨果渣中花色苷为研究对象,主要考察运用匀浆-微波联用的方法提取黑果茶藨中花色苷,并对不同种类的花色苷进行分离。采用匀浆-微波联用的方法从黑果茶藨中提取花色苷,并且通过单因素正交实验确定乙醇为提取溶剂。最合适的提取参数由 RSM响应面分析并且确定:微波功率550 W,微波时间16 min,乙醇浓度60%,匀浆时间3 min,液料比28.3 mL/g,抗氧化剂0.3%的TBHQ,提取液pH2.5,实际从黑果茶藨中提取花色苷473.7±9.5μg/g。黑果茶藨中含有六种花色苷,分别为矢车菊素-3-葡萄糖苷、矢车菊素-3-芸香糖苷、飞燕草素-3-葡萄糖苷、飞燕草素-3-芸香糖苷、矢车菊素-3-(6-香豆酰基)-葡萄糖苷和矮牵牛素-3-(6-香豆酰基)-葡萄糖苷。黑果茶藨中含有大部分的前四种花色苷成分,并利用高速逆流色谱法进行分离,采用甲基叔丁基醚:正丁醇:乙腈:水:三氟乙酸(2:2:1:5:0.001)为溶剂系统以及转速1000 r/min、流速1.5 mL/min、检测波长530 nm、温度30℃等操作参数,可以成功的分离出四种主要的花色苷:矢车菊素-3-葡萄糖苷、矢车菊素-3-芸香糖苷、飞燕草素-3-葡萄糖苷、飞燕草素-3-芸香糖苷。

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