利用绵羊多能性因子诱导小鼠体细胞为多能性干细胞

摘要

1 绪论

1．1 诱导多能干细胞

1．1．1 关于细胞命运可塑性的研究

1．1．2 诱导多能干细胞的建立与发展

1．1．3 体细胞重编程的分子机制

1．1．4 iPS技术现存的问题及未来的展望

1．2 绵羊iPS技术

1．2．1 iPS技术与转基因大型家畜的研究

1．2．2 绵羊iPS研究现状

1．2．3 绵羊iPS技术的主要难点

1．2．4 绵羊iPS技术的研究意义

1．2．5 绵羊iPS技术展望

1．3 研究利用绵羊因子诱导小鼠iPS细胞的意义

2 利用绵羊四因子诱导小鼠体细胞为iPS细胞

2．1 实验材料

2．1．1 实验动物、实验质粒、实验菌株以及实验细胞

2．1．2 主要试剂及药品

2．1．3 实验溶液的配制

2．1．4 实验设备以及仪器

2．2 实验方法

2．2．1 实验所需质粒的准备

2．2．2 实验细胞的准备及培养

2．2．3 逆转录病毒的包装与侵染

2．2．4 靶细胞形态变化的观察以及iPS克隆的挑取、传代和扩增

2．2．5 iPS克隆的鉴定

2．3 实验结果

2．3．1 绵羊诱导因子逆转录病毒载体的鉴定

2．3．2 MEF的分离及培养

2．3．3 Plat-E的复苏与传代

2．3．4 逆转录病毒的包装及对靶细胞的侵染

2．3．5 iPS诱导过程中细胞状态的改变

2．3．6 iPS克隆的鉴定

2．3．7 绵羊四因子逆转录病毒表达系统重编程效率的评价

2．4 讨论

结论

参考文献

附录

攻读学位期间发表的学术论文

致谢

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