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解淀粉芽孢杆菌15--1--1发酵条件优化及对辣椒根腐病防治效果初探

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摘要

1 引言

1.1 辣椒根腐病的概述

1.2 辣椒根腐病病原和其发病规律

1.3 植物病害的生物防治研究概况

1.3.1 植物病害生物防治的概念

1.3.2 植物病害生物防治的发展

1.3.3 生防细菌的主要类型

1.4 生防菌的生防机制

1.4.1 竞争作用

1.4.2 拮抗作用

1.4.3 溶菌作用

1.4.4 诱导抗病病性

1.5 培养基对发酵的影响

1.5.1 碳源物质对发酵的影响

1.5.2 氮源物质对发酵的影响

1.5.3 无机盐对发酵的影响

1.6 其他发酵参数对发酵的影响

1.6.1 初始pH值对发酵的影响

1.6.2 温度对发酵的影响

1.6.3 溶解氧对发酵的影响

1.6.4 初始接种量对发酵的影响

1.6.5 装液量对发酵的影响

1.7 研究目的和意义

2 材料与方法

2.1 试验材料

2.1.1 供试菌株

2.1.2 供试辣椒品种

2.1.3 培养基

2.1.4 主要仪器

2.2 试验方法

2.2.1 种子液体制各

2.2.2 菌量与吸光度相关性的测定

2.2.3 无菌发酵液抑菌活性的测定

2.2.4 初始发酵培养基的筛选

2.2.5 发酵液培养基的成分的优化

2.2.6 摇瓶发酵条件的优化

2.2.7 培养基优化后产抑菌物质的能力

2.2.8 15-1-1菌株发酵产物稳定性研究

2.2.9 解淀粉芽孢杆菌15-1-1无菌发酵液的抑菌谱测定

2.2.10 15-1-1菌株发酵液防治辣椒根腐的效果

2.3 数据统计分析方法

3 结果与分析

3.1 15-1-1菌量与吸光度相关性

3.2 初始发酵培养基筛选

3.3 培养基营养成分对15-1-1菌株生长和产抑菌物质的影响

3.3.1 碳源对15-1-1菌株生长及抑菌活性的影响

3.3.2 氮源对15-1-1菌株生长及抑菌活性的影响

3.3.3 无机盐对15-1-1菌株生长及抑菌活性的影响

3.3.4 15-1-1菌株培养基成分的正交试验

3.4 发酵条件对15-1-1菌株生长和产抑菌物质的影响

3.4.1 温度对15-1-1菌株发酵的影响

3.4.2 初始PH对15-1-1菌株发酵的影响

3.4.3 接菌量对15-1-1菌株发酵的影响

3.4.4 装液量对15-1-1菌株发酵的影响

3.4.5 摇床转速对15-1-1菌株发酵的影响

3.4.6 培养时间对15-1-1菌株发酵的影响

3.5 培养条件优化后产抑菌物质的能力

3.6 15-1-1菌株发酵产物稳定性

3.6.1 对紫外光和自然光稳定性测定

3.6.2 热稳定性测定

3.6.3 酸碱稳定性测定

3.6.4 耐储藏性测定

3.7 15-1-1菌株无菌发酵液的抑菌谱

3.8 解淀粉芽孢杆菌15-1-1发酵液对辣椒根腐病的盆栽防效

4 讨论

4.1 关于解淀粉芽孢杆菌15-1-1培养基成分优化的问题

4.2 关于解淀粉芽孢杆菌15-1-1培养条件优化问题

4.3 关于解淀粉芽孢杆菌15-1-1发酵液对辣椒根腐病盆栽防效的问题

4.4 关于解淀粉芽孢杆菌15-1-1的应用前景

5 结论

5.1 确定解淀粉芽孢杆菌15-1-1的最佳发酵培养基

5.2 解淀粉芽孢杆菌15-1-1的最佳摇瓶发酵条件

5.3 解淀粉芽孢杆菌15-1-1无菌发酵液具有广谱抑菌活性

5.4 解淀粉芽孢杆菌15-1-1无菌发酵液具有良好的稳定性

5.5 解淀粉芽孢杆菌15-1-1发酵液对辣椒根腐病有良好防治效果

致谢

参考文献

攻读硕士学位期间发表的学术论文

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摘要

15-1-1是由东北农业大学农药实验室由黑龙江省辣椒根际的土壤中筛选分离获得的一株解淀粉芽孢杆菌。本文对解淀粉芽孢杆菌15-1-1菌株的发酵培养基成分和培养条件进行了优化,同时也对15-1-1菌株的抑菌谱、无菌发酵液稳定性和防治辣椒根腐病室内盆栽效果进行研究,主要研究结论如下: 1.解淀粉芽孢杆菌15-1-1的摇瓶发酵培养基最佳营养成分及配比为葡萄糖2.0%,蛋白胨0.5%,酵母浸膏1.0%,NaCl0.5%。解淀粉芽孢杆菌15-1-1的摇瓶发酵最适发酵条件为摇床转速150r/min,接种量5%,初始培养基pH为7.0,250mL三角瓶装液量为40mL,32℃恒温条件下培养36h。 2.对解淀粉芽孢杆菌15-1-1菌株无菌发酵液的稳定性研究结果表明:解淀粉芽孢杆菌15-1-1发酵液在紫外光和自然光照射下有良好的稳定性;15-1-1的发酵液在60℃以下温度条件有较强稳定性,在80℃以上温度条件下,随着加热时间的延长,其活性物质的稳定性逐渐下降,无菌发酵液具有一定的耐高温稳定性;无菌发酵液在中性和弱酸性的环境条件下抑菌活性保持稳定;无菌发酵液具有较强的耐储藏稳定性。 3.对解淀粉芽孢杆菌15-1-1无菌发酵液的抑菌谱研究发现,该菌株无菌发酵液对核盘菌、尖镰孢菌、立枯丝核菌、大丽花轮枝孢、麦根腐平脐蠕孢、大豆疫霉等多种植物病原真菌具有明显的抑制作用,为15-1-1作为生防菌防治辣椒根腐病提供了一定的理论依据。 4.室内盆栽试验研究解淀粉芽孢杆菌15-1-1对辣椒根腐病的防治效果。分别在接种辣椒根腐病病原菌前48h,24h和0h喷施15-1-1菌株的发酵液,接种7天后防效分别达95.4%,85.3%,75.9%和75.9%,接种14天后防效分别为91.7%,64.7%和57.4%,接种21天后防效分别为75.8%,53.6%和43.7%。研究结果表明:15-1-1菌株发酵液对辣椒根腐病有较好的防治效果。

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