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不同基因型樱桃植株再生体系的研究

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摘要

本研究旨在进一步优化和拓宽樱桃不同基因型组织培养和快速繁殖体系,以离体叶片、离体叶柄、节间、根等多种外植体为试材,探讨并丰富樱桃遗传转化体系的再生系统。
   以樱桃杂种优系‘F8’(Prunus.avium L.×Prunus . Pseudocerasus L.)、‘F10’(Prunus.avium L.×Prunus. Pseudocerasus L.)、‘H8’(Prunus. Cerasus L ×Prunus.pseudocerasus L.)和‘H10’(Prunus. Cerasus L ×Prunus.pseudocerasus L.)的茎尖为材料,MS和F14为基本培养基,通过添加不同浓度的6-苄基氨基腺嘌呤(6-BA)、3-吲哚丁酸(IBA)、赤霉素(GA3)进行杂种樱桃再生体系的构建研究,结果表明:F14+6-BA (0.3~0.5)mg/L+GA30.1 mg/L适合各个杂种优系初代培养诱导出植株,F14+6-BA (0.5~1.0)mg/L+IBA(0.1~0.3)mg/L +GA30.1mg/L能够很好的促进各个杂种优系分化不定芽,1/2MS+IBA0.5mg/L(或NAA 0.8mg/L)是各个杂种优系的最佳生根培养基。
   以甜樱桃(Prunus avium L.)品种‘meizao’和‘Summit’、杂种优系‘F8’、‘F10’、‘H8’和‘H10’等不同基因型的试管苗为材料,进行樱桃离体叶片、叶柄、子叶、节间、根再生试验。结果表明:甜樱桃品种‘meizao’的离体叶片在WPM+6-BA 2.0mg/L +IAA 2.0mg/L +GA30.1mg/L培养基上,不定芽再生率可达到90%,‘H10’、‘Summit’、‘F10’、‘F8’在6-BA2~2.5mg/L、IAA 1.0~2.0mg/L的激素配比范围内,也获得了76.0%、86.0%、80.0%、64.0% 的再生率。离体叶片接种后暗培养1周、远轴面向下接种和选择试管苗上部的幼嫩叶片,均有利于叶片再生。优系‘H10’叶柄接种于改良MS+6-BA2.0 mg/L+IBA0.1mg/L +2,4-D0.5mg/L的培养基,可获得40.0%的再生率,其他品种仅有H8的叶柄获得了少量的再生植株。选择带一小块叶片的叶柄和5mg/L的硝酸银处理有利于叶柄再生;优系‘F10’的幼嫩节间接种于LS+6-BA1.0mg/L+NAA2.0 mg/L+CH100mg/L培养基,最高再生率为40.0%,在6-BA1~2mg/L和NAA1~2mg/L的激素配比范围内,‘H8’、‘H10’的离体节间再生率最高分别为25.0%和30.0%。选择试管苗黄化处理的节间,再生率要低于未经过黄化处理的节间;优系‘H8’整体根在MS+6-BA1.0mg/L +2,4-D2.0mg/L + IBA0.05mg/L + NAA 0.05mg/L的培养基上,达到了96.7%的再生率,在6-BA 0.5~2mg/L和2,4-D 0.5~2.0mg/L的激素配比范围内,‘H10’、‘F8’、‘F10’离体根再生率分别为93.3%、96.7%和93.3%。另外,根切段接种没有整体根再生频率高。
   以樱桃杂种优系‘H8’试管苗的离体节间和中国樱桃‘对樱’的试管苗离体叶片为材料,MS为基本培养基,通过调整植物激素种类和浓度,筛选适合‘H8’试管苗离体节间和‘对樱’离体叶片再生不定根的培养基配方,结果表明:‘H8’离体节间和‘对樱’离体叶片,均在培养基MS+NAA1.0mg/L上获得了最大的不定根再生率64.0%和80.0%,NAA浓度过大或过低均不利于不定根再生。离体叶片和离体节间再生不定根的成功,从多角度、多层次建立樱桃离体再生不定芽提供了新途径。

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