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雌激素和胰岛素样生长因子1协同促进小鼠肺腺癌进展的实验研究

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本硕士学位论文创新点

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1 前言

2 材料和方法

2.1 器材/试剂/抗体

2.2 实验动物

2.3 组织处理和肿瘤检测

2.4 组织芯片-免疫组织化学

2.5 免疫印记

2.6 实时荧光定量PCR

2.7 统计分析

3 结果

3.1 小鼠肺部肿瘤的生长情况

3.2 ERα、ERβ、IGF-1、IGF-1R、Ki67在各组小鼠肺腺癌组织中的表达及相关性分析

3.3 ERβ信号与IGF-1R信号通路活性检测

3.4 ERβ/ERβ2/IGF-1R mRNA在各组小鼠肺腺癌组织中的表达

4 讨论

参考文献

综述1雌激素受体β亚型在肿瘤中的研究进展

1 前言

2 ERβ1~5亚型的结构、分布和信号转导途径

3 ERβ1~5亚型在肿瘤中的功能研究

4 总结与展望

5 参考文献

综述2雌激素受体与雌激素非靶器官肿瘤的研究进展

1 前言

2 ER结构与分布及信号转导途径

3 ER与靶器官肿瘤

4 ER与非靶器官肿瘤

5 总结与展望

6 参考文献

硕士期间参与的研究项目

致谢

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摘要

目的:众多研究发现,雌激素(estrogenreceptor,ER)和胰岛素样生长因子1受体(Insulin-likegrowthfactor-1receptor,IGF-1R)两条信号通路各自在肺癌的恶性进展中起重要的促进作用,但它们之间有无协同促进作用尚无报道。我们在先前研究发现人肺癌组织和细胞中雌激素上调肺癌中IGF-1R信号通路基础上,采用实验动物模型探讨雌激素与IGF-1在小鼠肺癌进展中有无协同促进作用及其可能的机制。
  方法:昆明雌鼠切除卵巢后,建立乌拉坦诱导小鼠肺腺癌模型,分为17β-雌二醇(Estradiol,E2,ER配体)组、E2+氟维司群(Fulvestrant,Ful,雌激素抑制剂)组、IGF-1(IGF-IR配体)组、IGF-1+AG1024(IGF-1抑制剂)组、E2+IGF-1组、E2+IGF-1+Ful+AG1024组、空白对照组进行相应处理,满14周处死小鼠检测成癌率等肺腺癌生长情况。采用组织芯片-免疫组织化学(TMA-IHC)法检测各组肺癌组织ERα/ERβ/IGF-1/IGF-1R/Ki67表达,Western-blot检测IGF-1/p-ERβ/p-IGF-1R/p-MAPK/p-AKT表达,荧光定量PCR检测ERβ/ERβ2/IGF-1R的mRNA表达。
  结果:小鼠肺腺癌模型的总成瘤率为93.88%(46/49),总成癌率为75.51%(37/49)(病理诊断为肺腺癌);肺结节数、肿瘤分级、肿瘤指数、肺脏器指数在配体组显著高于相应配体+抑制剂组(P<0.05),E2+IGF-1组体重增长、肺结节数、肿瘤分级、肿瘤指数、肺脏器指数显著高于E2组(P=0.045,0.010,0.011,0.010,0.001)、IGF-1组(P=0.031,0.002,0.011,0.002,0.000)和对照组(P=0.017,0.000,0.000,0.000,0.000)。与此相一致,肺癌组织中ERβ/p-ERβ/ERβ2/IGF-1/IGF-1R/p-IGF-1R/p-MAPK/p-AKT/Ki67在蛋白水平和/或mRNA表达水平E2组显著高于E2+Ful组和对照组,IGF-1组显著高于IGF-1+AG1024组和对照组,E2+IGF-1组显著高于E2组、IGF-1组和对照对(p值均小于0.05)。
  结论:本实验在昆明小鼠肺腺癌模型首次发现雌激素与IGF-1协同促进小鼠肺腺癌进展,其机制可能与激活MAPK和AKT信号通路有关,其中ERβ1、2与IGF-1R可能在这种协同作用中扮演重要角色。因此联合阻断雌激素和IGF-1信号通路的多个靶点进而抑制肺癌进展可能存在潜在治疗价值。

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