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一种变态反应性炎症哮喘小鼠模型的建立与评价

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缩略词及中英文对照

中文摘要

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前言

参考文献

主 要 仪 器

实 验 材 料

一、实验动物

二、实验主要试剂

三、实验试剂的配制:

实验方法

(一)动物模型的建立:

(二)标本收集

(三)指标的测定

实 验 结 果

一、小鼠一般性观察:

二、肺泡灌洗液中细胞学的改变:

三、肺泡灌洗液中肥大细胞的染色:

四、外周血和肺泡灌洗液中IL-4和IFN-γ含量的测定:

五.肺组织病理:

讨论

参考文献

综述

参考文献

致谢

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摘要

目的:研究一种变态反应性炎症哮喘小鼠模型的建立方法,并评价其效果。
  方法:(1)将20只清洁级雌性BALB/c小鼠随机编号后分成两组:支气管哮喘模型组和空白对照组。(2)致敏:于实验第0、7、14天每只小鼠分别腹腔注射0.2 ml致敏液(1.0mg/ml的OVA0.1 ml与等体积液态氢氧化铝佐剂混和),对照组用生理盐水代替。(3)激发:于第17-23天连续7天将小鼠置于密闭容器中,以0.8mg/ml OVA磷酸盐缓冲盐溶液20 ml雾化吸入,每天一次,每次30 min,。(4)激发后研究:在最后一次激发后48 h(第25天)处死小鼠,收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)进行白细胞总数以及嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞的计数和分类,收集支气管肺泡灌洗液上清液和小鼠血清,测定IFN-γ和IL-4,肺泡灌洗液行甲苯胺蓝染色观察肥大细胞(mastocyte,MC),同时留取肺组织行HE染色,观察模型组和对照组肺组织的病理变化。
  结果:模型组在激发过程中出现明显头面部瘙痒,呼吸加深加快,安静少动,弓背,前肢缩抬等哮喘急性发作表现。支气管肺泡灌洗液中白细胞总数及嗜酸性粒细胞分类明显增多。BALF经甲苯胺蓝染色后可见肥大细胞。血清及BALF中IFN-γ下降,IL-4增高。肺组织病理切片见小支气管及伴行血管周围有较多炎症细胞浸润,可见大量嗜酸性粒细胞,杯状细胞增生,平滑肌增厚,部分肺泡间隔融合形成肺气肿。而对照组小鼠肺组织肺泡管和肺泡壁结构完整,肺泡腔内清洁透亮,肺泡上皮细胞排列有序,与毛细血管与其它间质成分构成完整的肺泡呼吸膜,肺泡壁毛细血管密集,管腔通畅。
  结论:通过对实验小鼠腹腔注射OVA后再雾化吸入OVA,成功建立了变态反应性炎症哮喘小鼠模型。

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