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【6h】

促红细胞生成素对离体帕金森病模型黑质多巴胺神经元的保护作用及其机制的研究

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第一部分重组人促红细胞生成素预处理对黑质多巴胺神经元生存预后的影响 目的: 研究重组人促红细胞生成素（recombinant human erythropoietin，rhEPO）预处理对帕金森病模型中黑质多巴胺神经元生存预后的影响。 方法：健康SD大鼠分为五组：空白对照组，6-羟多巴组(6-Hydroxydopamine，6-OHDA)，6-OHDA+1u/ml rhEPO组，6-OHDA+6u/ml rhEPO组，6-OHDA+10u/ml rhEPO组。6-OHDA浸泡大鼠黑质脑片建立离体帕金森病模型。不同浓度rhEPO在不同时间点预处理黑质多巴胺神经元，观察黑质中酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase，TH)变化。 结果：rhEPO预处理能抑制6-羟多巴导致的黑质酪氨酸羟化酶免疫反应（tyrosine hydroxylase–immunoreactive，TH–IR)阳性细胞数减少，6u/ml rhEPO预处理在3h与6h时间点的保护作用优于1u/mlrhEPO预处理（P<0.01，P<0.05），10u/ml rhEPO预处理在3h与6h时间点的保护作用也优于1u/ml rhEPO预处理;但6u/ml rhEPO预处理与10u/ml rhEPO预处理对多巴胺神经元的保护作用差别无统计学意义（P>0.05）。 结论：rhEPO预处理对黑质多巴胺神经元具有保护作用。 第二部分重组人促红细胞生成素预处理对6-羟多巴诱导的离体帕金森病模型黑质多巴胺神经元凋亡的影响 目的：上一部分的实验表明了重组人促红细胞生成素（recombinant humanerythropoietin，rhEPO）对离体帕金森病模型中黑质多巴胺神经元具有保护作用，本部分研究rhEPO 预处理对离体帕金森病模型中黑质多巴胺神经元保护作用的机制。 方法：18 只SD 大鼠分成3组，脑片分别位于空白组、6-羟多巴组、6-羟多巴+6u/ml rhEPO组的人工脑脊液II中孵育6 小时。然后用免疫组化方法观测黑质中Caspase-3 免疫反应阳性细胞数的变化，TUNEL 法观测黑质中多巴胺神经元的凋亡情况。 结果：与6-OHDA组相比，6-OHDA+6u/ml rhEPO组中的Caspase-3 免疫反应阳性细胞及凋亡细胞减少，差异有统计学意义(P<0.01，P<0.01)。 结论：rhEPO 预处理减轻6-OHDA对离体帕金森病模型中多巴胺神经元的损伤，其机制可能与rhEPO 抑制黑质多巴胺神经元凋亡有关。 第三部分重组人促红细胞生成素预处理对6-羟多巴诱导的离体帕金森病模型黑质多巴胺神经元氧化应激的影响 目的: 第一部分的实验表明了重组人促红细胞生成素（recombinant humanerythropoietin，rhEPO）对离体帕金森病模型中黑质多巴胺神经元具有保护作用，本部分试验进一步研究rhEPO预处理对离体帕金森病模型中黑质多巴胺神经元保护作用的机制。 方法：6-羟多巴浸泡大鼠黑质脑片建立离体帕金森病模型。用6u/ml rhEPO预处理黑质多巴胺神经元，观察黑质氧化应激指标—丙二醛、谷胱甘肽、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的变化。 结果：与6-羟多巴组相比，6u/ml rhEPO预处理组的丙二醛值降低，谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶值增高。 结论：rhEPO预处理对黑质多巴胺神经元的保护作用的机制可能与rhEPO减轻氧化应激反应有关。

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