声明
摘要
缩略语表
1前言
1．1结核病
1．2结核分枝杆菌的致病机制
1．2．1细胞被膜
1．2．2细胞代谢相关因子
1．2．3转录调节因子
1．2．4分泌系统
1．3分泌蛋白的研究概况
1．3．1分泌蛋白的定义及分类
1．3．2分泌系统
1．3．3分泌蛋白在逃避宿主免疫方面的功能
1．3．4分泌蛋白的应用
1．3．5分泌蛋白的研究意义
1．4海分枝杆菌在结核病研究中的地位
1．5本研究的目的和思路
1．5．1研究目的
1．5．2研究思路
2材料与方法
2．1材料与试剂
2．1．1供试菌株、质粒和细胞株
2．1．2培养基
2．1．3抗生素和酶
2．1．4引物
2．1．5细胞实验相关试剂
2．1．6其它相关试剂
2．2实验方法
2．2．1分子生物学基本操作
2．2．2细菌分泌蛋白的收集与纯化
2．2．3蛋白质IBT定量实验步骤
2．2．4海分枝杆菌感受态的制备及电转化
2．2．5实时定量PGR
2．2．6细胞实验操作步骤
2．2．7细胞毒性检测
2．2．8细胞内ROS检测
2．2．9生长曲线的测定
3结果与分析
3．1海分枝杆菌分泌蛋白的蛋白质组测定及分析
3．1．1海分枝杆菌分泌蛋白的收集及检测
3．1．2海分枝杆菌分泌蛋白的鉴定及特异性肽段分析
3．1．3海分枝杆菌分泌蛋白的定量及重复性分析
3．1．4海分枝杆菌分泌蛋白质组的功能分析及差异比较
3．2海分枝杆菌分泌蛋白的功能研究
3．2．1分泌蛋白的筛选
3．2．2分泌蛋白的克隆及超表达菌株的构建
3．2．3分泌蛋白对巨噬细胞内细胞因子转录水平的调控作用
3．2．4分泌蛋白对巨噬细胞的细胞毒性作用的检测
3．2．5分泌蛋白对巨噬细胞内ROS产生水平的影响
3．2．6分泌蛋白对细菌的胞内存活的影响
4讨论与展望
4．1总结
4．2讨论
4．2．1分泌蛋白质组
4．2．2分泌蛋白与宿主细胞的ROS信号
4．2．3分泌蛋白和细菌的毒力因子
4．3展望
参考文献
致谢
