声明
摘要
缩略词表
1 前言
1.1.1 Bt基因的分类和命名
1.1.2 Bt蛋白的杀虫机理
1.2 转Bt基因棉花的发展
1.3 转Bt基因抗虫棉的鉴定方法
1.3.2 转Bt基因抗虫棉中Bt蛋白的检测
1.3.3 标记基因的检测
1.4.2 转Bt基因棉花毒蛋白表达的空间动态变化规律
1.6 本研究拟解决的问题
2 试验材料和方法
2.1 试验材料
2.1.1 抗虫性检测的棉花品种
2.1.2 新型抗虫基因转化的棉花受体品种
2.2 试验方法
2.2.1 田间杂交及不同遗传背景抗虫材料的形成
2.2.2 田间杂交及不同生育期抗虫材料的形成
2.2.3 田间种植和管理
2.2.4 棉花基因组DNA的提取
2.2.5 转Cry1Ab/Cry1Ac基因棉花的PCR鉴定方法
2.2.6 转Cry1Ab/Cry1Ac基因棉花外源蛋白表达量的测定
2.2.7 转Cry1Ab/Cry1Ac基因抗虫棉的室内生物测定
2.2.8 Cry1C*基因的载体构建及遗传转化
2.2.9 转Cry1C*基因再生植株的PCR检测
2.2.10 转基因植株Cry1C*蛋白含量的测定
2.2.11 转Cry1C*基因植株室内抗虫性鉴定
3 结果与分析
3.1 抗虫棉外源Cry1Ab/Cry1Ac基因的PCR检测
3.2 不同抗虫棉花品种的抗虫性差异
3.2.1 不同抗虫棉花品种Cry1Ab/Cry1Ac蛋白表达量的检测
3.2.2 不同来源棉花品种的抗虫性差异
3.2.3 Cry1Ab/Cry1Ac蛋白表达量与室内生物测定结果的相关性
3.3 抗虫Cry1Ab/Cry1Ac基因表达的组织特异性及环境的影响
3.3.2 同一棉花品种年度间外源Cry1Ab/Cry1Ac蛋白表达差异
3.4 不同遗传背景对Cry1Ab/Cry1Ac棉花抗虫性的影响
3.4.1 不同遗传背景对外源Cry1Ab/Cry1Ac蛋白表达的影响
3.4.2 不同遗传背景对Cry1Ab/Cry1Ac棉花抗虫性的影响
3.4.3 不同遗传背景Cry1Ab/Cry1Ac棉花Cry1Ab/Cry1Ac蛋白表达量与室内生物测定的相关性
3.5 不同熟性Cry1Ab/Cry1Ac棉花抗虫性差异
3.5.2 不同熟性Cry1Ab/Cry1Ac棉花的生物测定差异
3.5.3 棉花熟性与抗虫性的相关性分析
3.6 转Cry1C*基因植株的获取及抗虫性初步鉴定
3.6.3 转Cry1C*基因植株T1代叶片Cry1C*蛋白含量测定
3.6.4 转Cry1C*基因棉花T1代植株室内生物测定
4 讨论
4.3 影响转Bt基因棉花Bt蛋白表达的其它因素
4.3.1 抗虫Bt蛋白表达的组织特异性及环境的影响
4.3.3 材料方法对测定结果的影响
4.4 Bt蛋白表达量与室内生物测定结果的相关性
4.5 培育转Cry1C*基因棉花的意义
5 研究结论
参考文献
致谢