声明
摘要
第一章 文献综述
1 干预龋齿的天然产物活性成分的研究进展
2 变形链球菌表面毒力因子的相关研究
2.1 葡萄糖基转移酶(GTFs)
2.2 葡聚糖结合蛋白(GBPs)
3 天然产物活性成分与蛋白相互作用的表征方法
3.1 紫外-可见吸收光谱法
3.2 荧光光谱法
3.3 圆二色谱法
3.4 傅里叶变换红外光谱法
3.5 其他研究方法
4 论文研究内容
5 创新点
第二章 SPC四聚体的分离和鉴定
引言
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.2 实验方法
2 结果与讨论
2.1 SPC-Ⅵ级分的HPLC-MS/MS分析
3 小结
第三章 葡萄糖基转移酶B催化活性区的基因克隆与表达
引言
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.2 实验方法
2 结果与讨论
2.1 gtfB/CAT的克隆
2.2 pET-28b(+)-gtfB/CAT重组质粒双酶切鉴定
2.3 PCR产物测序结果
2.4 重组质粒pET28b(+)-gtfB/CAT在E.coli BL21中的诱导表达
2.5 GTFB/CAT包涵体蛋白的纯化及复性
2.6 GTFB/CAT蛋白酶活的测定
2.7 Nano LC-MS/MS鉴定
3 小结
第四章 葡萄糖结合蛋白B的基因克隆与表达
引言
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.2 实验方法
2 结果与分析
2.1 gbpB的克隆
2.2 双酶切产物的回收检测
2.3 PCR产物测序结果
2.4 重组质粒pET-28a-sumo-gbpB在Rosetta(DE3)中的小量表达
2.5 GBPB-sumo蛋白的大量表达
2.6 GBPB-sumo蛋白的纯化
2.7 Nano LC-MS/MS鉴定
3 小结
第五章 SPC四聚体与GTFB/CAT和GBPB-sumo蛋白相互作用机理的研究
引言
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.2 实验方法
2 结果与讨论
2.1 SPC四聚体对GTFB/CAT蛋白酶活的抑制作用
2.2 SPC四聚体与GTFB/CAT和GBPB-sumo蛋白相互作用的的荧光猝灭法研究
2.3 SPC四聚体与GTFB/CAT蛋白和GBPB-sumo蛋白相互作用的紫外-可见吸收光谱法研究
2.4 SPC四聚体与GTFB/CAT蛋白和GBPB-sumo蛋白相互作用的的圆二色光谱法研究
3 小结
第六章 结论与展望
1 结论
2 展望
参考文献
研究生期间发表文章
致谢