基于磁珠—酶放大免疫荧光方法检测猪胸膜肺炎放线杆菌感染血清中ApxIVA抗体

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缩略词表

1 文献综述

1.1 胸膜肺炎放线杆菌简介

1.1.1 胸膜肺炎放线杆菌简史及现状

1.1.2 猪胸膜肺炎放线杆菌毒力因子

1.1.3 胸膜肺炎放线杆菌的诊断方法

1.2 磁性微粒的功能及其应用

1.2.1 磁性微粒的特征

1.2.2 磁性微粒在生物学中的应用

1.3 目的和意义

2 材料与方法

2.1 实验材料

2.1.1 主要仪器

2.1.2 主要试剂

2.1.3 主要溶液的配置

2.2 实验方法

2.2.1 实验原理

2.2.2 ApxIVA抗原蛋白浓度测定

2.2.3 磁珠表面固定ApxIVA抗原蛋白最佳用量选择

2.2.4 最佳磁珠封闭剂的选择

2.2.5 免疫过程

2.2.6 荧光检测

2.2.7 敏感性、检测线性和重复性试验

2.2.8 特异性试验

2.2.9 用mp-FLIA和npxIVA-ELISA两种方法检测临床猪血清

2.2.10 ELISA操作步骤

3 结果与分析

3.1 BCA法测定APXIVA抗原蛋白浓度

3.2 磁珠表面固定APXIVA抗原蛋白及最佳固定用量

3.3 最佳封闭剂

3.4 实验条件优化

3.4.1 最佳过氧化氢用量

3.4.2 最佳对羟基苯乙酸用量

3.4.3 最佳包被ApxIVA磁珠用量

3.4.4 最佳酶标二抗用量

3.5 敏感性、线性和重复性

3.6 特异性

3.778组临床猪血清分析

4 讨论

5 结论

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间发表的论文