瓠瓜EST-SSR、SRAP、ISSR和RAPD反应体系的建立及其纯度鉴定应用的研究

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论文说明：缩略词表

声明

1.文献综述

1.1杂种纯度鉴定方法的发展历程

1.1.1形态鉴定

1.1.2物理化学鉴定

1.1.3指纹图谱鉴定

1.2指纹图谱技术在部分葫芦科蔬菜杂种纯度和真伪鉴定中的应用

1.2.1黄瓜的相关研究

1.2.2西瓜的相关研究

1.2.3甜瓜的相关研究

1.2.4其他瓜类的相关研究

1.3分子标记技术在葫芦科作物纯度和真伪鉴定中的问题和应用前景

1.3.1存在的问题

1.3.2应用前景

1.4研究的目的和意义

1.4.1研究的意义

1.4.2研究目的

2.EST-SSR标记技术鉴定瓠瓜品种的研究

2.1材料

2.1.1瓠瓜材料

2.1.2引物

2.1.3试剂及仪器

2.2方法

2.2.1杂交组合的配制

2.2.2田间试验设计

2.2.3 DNA提取及质量检测方法

2.2.4 EST-SSR标记PCR反应优化设计

2.3结果

2.3.1 EST-SSR反应体系的优化

2.3.2甜瓜、黄瓜EST-SSR标记在瓠瓜上的通用性

2.3.3 EST-SSR多态性引物的筛选及多态性分析

2.4讨论

2.4.1 EST-SSR反应稳定性及影响因素

2.4.2 EST-SSR标记在瓠瓜杂种鉴定上的应用

3.SRAP标记技术鉴定瓠瓜品种的研究

3.1材料

3.2方法

3.2.1 PCR反应体系的优化和建立

3.2.2引物的筛选

3.2.3 PCR扩增程序

3.2.4扩增产物检测技术的优化和建立

3.3结果与分析

3.3.1 SRAP反应体系的优化

3.3.2扩增产物检测技术的优化和建立

3.3.3多态性引物的筛选及其多态性分析

3.4讨论

3.4.1 SRAP反应稳定性及影响因素

3.4.2正交试验设计和单因素试验在PCR反应体系优化上的比较

3.4.3 SRAP标记在瓠瓜杂种鉴定上的应用

4.ISSR标记技术鉴定瓠瓜品种的研究

4.1材料

4.2方法

4.2.1 PCR反应体系优化设计

4.2.2引物的筛选

4.2.3 PCR扩增程序的优化

4.2.4扩增产物检测技术的优化和建立

4.3结果与分析

4.3.1 ISSR反应体系的优化

4.3.2扩增程序的优化

4.3.3扩增产物检测技术的优化和建立

4.3.4多态性引物的筛选及其多态性分析

4.4讨论

4.4.1 ISSR反应稳定性及影响因素

4.4.2 ISSR标记在瓠瓜杂种鉴定上的应用

5.RAPD标记技术鉴定瓠瓜品种的研究

5.1材料

5.1.1瓠瓜材料

5.1.2引物

5.1.3试剂及仪器

5.2方法

5.2.1 RAPD标记PCR反应优化设计

5.3结果

5.3.1 RAPD反应体系的优化

5.3.2 RAPD多态性引物的筛选及多态性分析

5.3.3 DNA指纹图谱类型的建立

5.4讨论

5.4.1 RAPD反应稳定性及影响因素

5.4.2 RAPD标记在瓠瓜杂种鉴定上的应用

5.4.3瓠瓜杂种鉴定的分子标记选择问题

6.结论

6.1四种分子标记最佳反应体系的建立

6.2四种分子标记多态性引物分析

6.3几种分子标记技术在瓠瓜杂种鉴定上的优劣比较

参考文献

附录

致谢