蓝藻FBP/SBPase活性位点重要氨基酸Lys29的研究及以其为靶标的抑制剂的筛选

声明

摘要

第一章绪论

1．1蓝藻水华

1．1．1蓝藻及蓝藻水华的介绍

1．1．2蓝藻水华的主要危害

1．1．3蓝藻水华的治理方法

1．2 FBPase和SBPase研究背景

1．2．1光合作用原理

1．2．2果糖-1，6-二磷酸酶(FBPase)

1．2．3景天庚酮糖1，7-二磷酸酶(SBPase)

1．3本文立题思想

第二章蓝藻FBP／SBPase活性位点重要氨基酸Lys29的研究

2．1引言

2．2实验原理

2．3实验材料

2．3．1主要仪器

2．3．2主要试剂与材料

2．3．3主要溶液的配制

2．4实验方法

2．4．1突变体的构建

2．4．2蓝藻FBP／SBPase及突变体蛋白的表达

2．4．3蓝藻FBP／SBPase及突变体的纯化

2．4．4用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测蛋白的纯度

2．4．5用Bradford方法测定蛋白含量

2．4．6蓝藻FBP／SBPase及突变体活性测定

2．4．9蓝藻FBP／SBPase及突变体热稳定性的测定

2．4．10不同pH下蓝藻FBP／SBPase及突变体活性的测定

2．5实验结果与讨论

2．5．1蓝藻FBP／SBPase及突变体蛋白纯度的检测及蛋白含量的测定

2．5．2蓝藻FBP／SBPase及突变体的比活力

2．5．3蓝藻FBP／SBPase及突变体的动力学参数测定

2．5．4蓝藻FBP／SBPase及突变体热稳定性比较

2．5．5 pH对蓝藻FBP／SBPase及突变体活性的影响

2．5．6蓝藻FBP／SBPase及突变体的稳定性

2．5．7本章小结

第三章以蓝藻FBP／SBPase为靶标的抑制剂的筛选

3．1引言

3．2实验材料

3．2．1主要仪器

3．2．2主要试剂

3．2．3 BG11培养基

3．2．4蓝藻的藻种及来源

3．3实验方法

3．3．1蓝藻的培养方法

3．3．2藻体抑制剂的筛选方法

3．3．3蓝藻抑制剂的筛选

3．3．4扫描电镜蓝藻样品的制备

3．4结果与讨论

3．4．1 CFL系列化合物抑制剂的筛选

3．4．2 D13-TQD160和D13-TQD170系列化合物抑制剂的筛选

3．4．3 D13和D7系列类似化合物抑制剂的筛选

3．4．4观察化合物抑制过的藻细胞形态的变化

3．4．5 D13M1和硫酸铜对FACHB 912抑制效果的比较

3．5本章小结

第四章全文总结

参考文献

致谢