人乳头瘤病毒16型E2蛋白诱导宫颈癌Caski细胞凋亡的分子机制的研究

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引言

材料与方法

1.1 材料

1.1.1主要仪器和设备

1.1.2 主要实验材料及试剂

1.1.3主要溶液配制

1.2 实验方法

1.2.1真核重组质粒的构建

1.2.2细胞培养

1.2.3细胞瞬时转染

1.2.4Western Blotting分析蛋白表达

1.2.5MTT检测细胞存活率

1.2.6AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡

1.2.7统计学方法

结果

第一部分 真核重组质粒pEF1-E2/NE2/HCE2-Myc-6His的构建及鉴定

2.1.1鉴定真核表达质粒载体的酶切位点BamHⅠ和ECORⅠ正确

2.1.2成功获得目的基因HPV16E2、HPV16NE2和HPV16HCE2

2.1.3成功构建并鉴定重组质粒pEF1-E2-Myc-6His、pEF1-NE2-Myc-6His和pEF1-HCE2-Myc-6His

第二部分 真核重组质粒pEF1-E2/NE2/HCE2-Myc-6His在宫颈癌Caski细胞中的成功表达

第三部分 高表达E2/NE2/HCE2对宫颈癌Caski细胞凋亡的影响

2.3.1MTT法检测E2/NE2/HCE2对Caski细胞的增殖情况的影响

2.3.2Western Blotting检测高表达E2/NE2/HCE2的Caski细胞中凋亡相关蛋白Cleaved-PARP的表达

2.3.3 AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒检测高表达E2/NE2/HCE2的Caski细胞凋亡情况

讨论

小结

参考文献

综述: 人乳头瘤病毒E2蛋白与宫颈癌的研究进展

后记

附录：攻读硕士学位期间发表的部分学术论著