声明
摘要
1.1研究意义
1.2早期生长应答基因1(EGR1)的研究现状
1.3 Pol Ⅰ及Pol Ⅲ指导的转录调控的研究现状
1.4立题背景、存在的问题和研究目标
2.1.1实验耗材
2.1.2实验试剂
2.1.3质粒和细胞
2.1.4细菌与细胞培养基
2.1.5实验仪器
2.2实验方法
2.2.1基因克隆
2.2.2细胞培养
2.2.3实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)
2.2.4免疫印迹试验(Western Blot,WB)
2.2.5细胞增殖检测
2.3数据处理分析方法
第3章实验结果
3.1 FLNA抑制EGR1的表达
3.2 EGR1 siRNA瞬时转染抑制部分Pol Ⅰ及Pol Ⅲ指导的基因转录
3.3 EGR1瞬时过表达促进部分Pol Ⅰ及Pol Ⅲ指导的基因转录
3.4 EGR1敲低稳定细胞系的建立
3.5 EGR1敲低稳定细胞系中Pol Ⅰ及Pol Ⅲ基因转录产物分析
3.6 EGR1过表达稳定细胞系的建立以及Pol Ⅰ及Pol Ⅲ基因转录分析
3.7 FLNA-EGR1双敲低稳定细胞系的建立
3.8 FLNA-EGR1双敲低稳定细胞系中Pol Ⅰ及Pol Ⅲ指导的基因转录产物分析
3.9 EGR1促进细胞的增殖
3.10 EGR1通过影响Rho A和PTEN的表达调节Pol Ⅰ及Pol Ⅲ指导的基因转录
4.1结论
4.2展望
致谢
参考文献
附录