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人面果抗氧化与抗糖尿病活性的初步研究

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第1章 前 言

1.1 氧化应激与糖尿病

1.2 口山酮类化合物抗糖尿病活性研究进展

1.3 课题提出

第2章 人面果提取物抗氧化活性研究

2.1 实验材料与方法

2.2 实验方法

2.3 结果与讨论

2.4 小结

第3章 人面果提取物抗糖尿病活性研究

3.1 实验材料与方法

3.2 实验方法

3.3 结果与讨论

3.4 小结

结 论

参考文献

致谢

附录A 攻读学位期间发表的学术论文

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摘要

人面果(Garciniaxanthochymus)高达10-20m,是我国传统傣药之一,生于海拔100-1000m的沟谷、丘陵、潮湿的密林中,主要分布在云南南部和西南部,具有驱虫、清火退热、解食物中毒之功效。前期研究表明人面果果实、根部及叶子含有二苯甲酮衍生物、黄酮、三萜和口山酮类等化合物,其中口山酮类化合物作为活性成分具有较广泛的生物活性,如抗氧化、抗糖尿病、抗菌、抗细胞毒素、抗HIV病毒等。本文利用系统溶剂提取法得到人面果各部位浸膏,并利用相应评价方法进行抗氧化与抗糖尿病活性研究。
　　采用铁氰化钾还原法、DPPH法、ABTS法测定人面果叶子、果实和根部的抗氧化活性(抗坏血酸和BHT作为阳性对照),Folin-Ciocalteu比色法测定各提取物总酚含量,并将活性提取物进行DNA损伤保护作用研究及HPLC分析。结果表明,抗氧化活性与总酚含量、DNA损伤保护作用具有一定的关系,总酚含量较高的提取物具有较高的抗氧化活性,且具一定的DNA损伤保护作用。而且研究发现叶子部位的乙酸乙酯提取物总酚含量最高(36.76±0.26mgGA/100mg),具有比人工合成抗氧化剂BHT更高的还原能力及与BHT相当的清除DPPH、ABTS自由基的能力(叶子乙酸乙酯提取物IC50分别为6.10±0.01?g/ml和6.74±0.09?g/ml,阳性对照BHT的IC50分别为5.67±0.02?g/ml和9.29±0.14?g/ml)。叶子正丁醇提取物、果实乙酸乙酯与石油醚提取物、根部乙酸乙酯与正丁醇提取物也具有一定的抗氧化能力。基于以上成果可为进一步从人面果中合理有效地分离出具有更高抗氧化活性成分提供一定理论依据。
　　从酶、细胞和动物实验研究了人面果提取物的抗糖尿病活性。结果表明根部正丁醇与乙酸乙酯提取物、果实乙酸乙酯提取物、叶子乙酸乙酯提取物显示了很好的α-葡萄糖苷酶抑制活性,IC50分别为13.01±0.38μg/ml、14.05±0.24μg/ml、17.81±1.09μg/ml、18.60±1.56μg/ml(阳性对照阿卡波糖>200μg/ml)。根部石油醚、乙酸乙酯、正丁醇提取物及果实石油醚提取物的α-淀粉酶抑制活性相对较高,IC50分别为0.482±0.079mg/ml、0.667±0.071mg/ml、0.831±0.062mg/ml、0.892±0.075mg/ml,但还是明显低于标准品阿卡波糖(41.03±3.58?g/ml)。在HepG2葡萄糖消耗实验中,果实乙酸乙酯提取物在7.5-30?g/ml的浓度下,能极显著地促进细胞消耗葡萄糖(P<0.001),且呈剂量依耐性,叶子乙酸乙酯提取物、根部正丁醇提取物、根部乙酸乙酯提取物也显示了一定的促糖消耗作用,它们在30?g/ml、25?g/ml、7.5?g/ml时使GCrate达到了3.08、3.12、1.93,比果实乙酸乙酯(GCrate为3.91)相比略低。采用烟酰胺与STZ腹腔注射制造糖尿病小鼠模型,给药10天后,叶子乙酸乙酯组、果实乙酸乙酯组、格列本脲组糖尿病小鼠的血糖值与模型对照组相比差异显著(P<0.05),而根部乙酸乙酯组和根部正丁醇组与模型对照组相比差异不显著(P>0.05)。以上成果表明人面果提取物具一定的抗糖尿病活性,这为人面果活性进一步开发提供了一定的理论基础。

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