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弓形虫卵囊壁蛋白TgOWP8在猪和鸡血清中抗体检测的应用

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摘要

弓形虫是一种能广泛寄生于多种动物细胞内的机会致病性原虫。其传播途径主要有先天性传播和获得性传播两种途径;人或动物可通过食用被卵囊和包囊污染的食物等途径引发获得性感染。因此弓形虫的卵囊和包囊对这种寄生虫的传播起到关键的作用;研究表明卵囊引发的弓形虫感染可能比组织包囊获得的感染更具临床研究意义。 TgOWP8 是一种新鉴定的弓形虫卵囊壁蛋白;但其具体研究仍然较少。本研究对TgOWP8进行了研究;以表达和纯化的TgOWP8重组蛋白为基础;在一抗稀释度为1:50;二抗稀释度为 1:20000;显色时间 25min 的条件下;对包被浓度进行梯度稀释;确定TgOWP8的ELISA最佳包被浓度5μg/ml;并应用虫体裂解抗原(TLA)和TgOWP8对猪速殖子阳性和阴性血清、养殖场猪和鸡血清进行ELISA检测。并将两种蛋白的 ELISA检测结果进行比较和分析;猪速殖子血清检测结果显示:阳性血清 TLA 阳性率为 100%(15/15);TgOWP8阳性率为93%(14/15);阴性血清无差异;表明TgOWP8蛋白能较好的区分弓形虫感染途径;养殖场猪血清检验结果显示;TLA阳性率为16.7%(15/90);TgOWP8阳性率为12.2%(11/90);散养鸡血清检验结果显示;TLA阳性率为10.4%(10/96);TgOWP8阳性率为 13.5%(13/96);表明采集地区的猪及鸡弓形虫感染途径主要是通过卵囊感染。并用Westing blot对阳性血清进行了验证。证明TgOWP8可以作为弓形虫检测卵囊感染的指标。

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