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人参发根抗氧化、抗皮肤癌及抗紫外线作用研究

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癌症严重威胁人类健康，每3例确诊癌症病例中有1例是皮肤癌，全世界每年发生200多万例皮肤癌病例，其中恶性黑色素瘤的死亡率极高。紫外线的辐射是皮肤癌发生的重要因素之一。随着臭氧层的破坏，越来越多的紫外线到达地面，人体长期暴露在紫外光下尤其是中波紫外线（UVB），会引起皮肤衰老、DNA损伤、光老化甚至癌变。目前人参有效成分抗肿瘤、抗紫外线的研究已成为热点。但人参及其提取物中的重金属、农药和溶剂残留等会带来安全风险，人参生长过程缓慢且大面积占用森林土地，为解决伐林栽参、老参地问题，科研人员以人参茎叶为外植体诱导出人参发根，工厂化生产人参皂苷。人参发根研究多集中于发根诱导、培养条件优化、生产次生代谢产物。尚未发现人参发根抗黑色素瘤、抗紫外线的作用研究。所以本实验选择富含人参皂苷、多糖、氨基酸有效成分，而无农药、无重金属及质量稳定的人参发状根及其培养液为原料，首先，通过HPLC、苯酚-硫酸法，对其有效成分进行测定;其次，采用Cu2+螯合能力、PPO、FRAP三种方法对人参发根进行抗氧化功效评价;再次，对人参发根的体外抗黑色素瘤活性进行研究;最后，依据功效评价结果，研制一款具有护肤作用的人参发根护肤液，对其抗紫外线功效、机理进行研究，以期为人参发根药理作用进一步研究及其应用，提供理论依据和参考。实验结果如下： 1、人参发根抗氧化能力显著，随着浓度的增大，人参发根的 Cu2+ 螯合率逐渐接近VC，在100 mg/mL时人参发根的Cu2+螯合率与VC差异不显著（P＞0.05）;人参发根与VC有相同的酶活力清除趋势，40 -100 mg/mL时两者差异不显著（P＞0.05）;人参发根的总抗氧化能力在100 mg/mL时达到 0.8774 mmol FeSO4/g。 2、人参发根抑制黑色素瘤A375细胞增殖（P＜0.05）;抑制A375细胞中TYR的活性（P＜0.05）;使细胞中黑色素生成减少;降低细胞迁移、侵袭能力;和对照组相比人参发根组、人参组及达卡巴嗪组均出现明显的凋亡细胞，人参发根组较人参组和达卡巴嗪组晚期凋亡率高（P＜0.05），其机理是将皮肤癌细胞的周期阻滞在S、G2/M期实现的。人参发根促进人皮肤角质层细胞HaCaT增殖，促进细胞划痕愈合，对HaCaT细胞起到保护作用效果强于人参（P＜0.05），达卡巴嗪因对HaCaT细胞产生细胞毒性作用进而抑制细胞增殖。 3、人参发根护肤液的制备工艺：取90mL去离子水加入5mL甘油、5mL丙二醇搅拌均匀，加入0.1g透明质酸钠混匀后在高速搅拌下缓慢加入0.1g卡波姆，用10%氢氧化钠调节pH，作为基质，与人参发根醇提物配制成10 mg/mL的人参发根护肤液。 4、人参发根提高了小鼠皮肤中Hyp含量、GSH-Px活性，降低MDA含量，增加CAT、SOD活力（P＜0.05）;人参发根组小鼠皮肤中IL-6、TNF-α含量均减少，以人参发根高剂量组最好（P＜0.05）;人参组、人参发根中、高剂量组有效改善UVB所致的小鼠皮肤损伤、脱屑现象，降低小鼠表皮层厚度，减少炎性浸润及角质层过度角化，保护胶原纤维;模型组小鼠皮肤中的MMP-1、MMP-3蛋白表达水平显著高于正常对照组（P＜0.05），人参组、人参发根低、中、高剂量组MMP-1、MMP-3蛋白表达水平显著下降（P＜0.05）。

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