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聚磷酸钙纤维/磷酸钙骨水泥复合材料生物相容性的体外实验研究

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第1章 绪 论

1.1 引言

1.2 骨修复材料

1.3 生物相容性

1.4 磷酸钙骨水泥

1.5 CPC复合增强材料

1.6 研究思路

第2章 材料和方法

2.1 实验材料与试剂

2.2 实验方法

第3章 结 果

3.1 人成骨细胞样细胞系 MG63 复苏和传代培养后细胞形态学及生长特性观察

3.2 人成骨细胞样细胞系 MG63 与复合材料共培养后细胞形态学观察

3.3 MG63 细胞与复合材料浸提液共培养后细胞形态学及生长情况观察

3.4 MTT法各组MG63细胞生长和增殖情况比较

3.5 各组MG63细胞凋亡百分率和细胞周期的比较

第4章 讨 论

第5章 结 论

参考文献

综 述:

研究生学习期间完成的论文及成果

附 录:

致谢

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摘要

目的:在体外实验条件下,评价聚磷酸钙纤维/磷酸钙骨水泥复合材料的细胞生物相容性及探讨聚磷酸钙纤维和磷酸钙骨水泥配比不同对复合材料细胞生物相容性的影响,为该复合材料应用于临床提供一定的理论基础。
  方法:将聚磷酸钙纤维和磷酸钙骨水泥按质量比0:10、1:9、2:8、3:7、4:6、5:5分别制成复合材料模块,按复合材料1g浸提介质10ml的比例,选用含体积分数为10%胎牛血清的DMEM作为浸提介质,制备不同比例复合材料的浸提液。
  设置阴性对照组(含10%胎牛血清的DMEM)、实验组(不同配比复合材料的浸提液)及阳性对照组(6.4g/l的苯酚溶液)。
  复苏并传代培养MG63细胞,分别与复合材料及其浸提液共培养:
  (1)使用倒置显微镜观察不同时间细胞形态学改变;
  (2)采用MTT法检测细胞生长增殖情况;
  (3)采用流式细胞术检测细胞凋亡百分率及细胞周期。
  结果:(1)细胞在复合材料表面粘附生长,细胞形态正常,生长良好;
  (2)细胞与复合材料浸提液共培养,不同时间点观察细胞,实验组生长良好,增殖迅速,情况基本同阴性对照组,二者明显优于阳性对照组,阳性对照组细胞数量逐渐减少,形态异常,最终裂解死亡;
  (3)MTT法检测显示,随着培养时间的延长,除阳性对照组以外,实验组和阴性对照组A值逐渐增高,且增高显著(P=0.000),培养24h、48h、72h时实验组和阴性对照组之间A值差异均无统计学意义(P>0.05),实验组(各比例复合材料浸提液组)之间A值两两比较差异亦均无统计学意义(P>0.05),培养24时,实验组和阴性对照组A值稍高于阳性对照组,但差异尚无统计学意义(P>0.05),培养48h、72h时,阳性对照组A值均明显低于实验组和阴性对照组(P=0.000);
  (4)流式细胞术检测可见,培养48h后,实验组和阴性对照组细胞凋亡百分率相近且明显低于阳性对照组。
  结论:聚磷酸钙纤维/磷酸钙骨水泥复合材料具有良好的细胞生物相容性,复合材料配比不同对成骨细胞的生长、增殖及凋亡的影响无明显差异。

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