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【6h】

纳米介孔硅载七叶皂苷钠对粪肠球菌的体外抗菌作用研究

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摘要

目的:
  分别比较氨基改性前后的介孔硅负载七叶皂苷钠药物(SA-SBA-15及SA-NH2-SBA-15)和氢氧化钙(Ca(OH)2)在体外对粪肠球菌的抑菌、杀菌作用,分析其优缺点,为新型根管封药材料研发提供新思路。
  方法:
  1、直接购买氨基改性前的介孔硅材料SBA-15,观测其形态、红外光谱图像、吸附-脱附能力,用于载药研究。
  2、采用直接嫁接法制备氨基改性后的NH2-SBA-15,观测其形态、红外光谱图像、吸附-脱附能力。
  3、再使用乙醇溶解-水浴超声-电机搅拌法制备SA-NH2-SBA-15及SA-SBA-15,完成后检测介孔硅药物的形态、粒径、载药量等,比较两者的缓释特性。
  4、采用液体稀释法药敏实验、MTT比色法测定SA-NH2-SBA-15、SA-SBA-15及Ca(OH)2在体外对粪肠球菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);采用液体扩散法肉眼观察不同浓度SA-NH2-SBA-15、SA-SBA-15及Ca(OH)2在体外对粪肠球菌抑菌圈的大小,评价SA-NH2-SBA-15、SA-SBA-15及Ca(OH)2的抑菌效果;制备3.5mg/mL的SA-NH2-SBA-15、SA-SBA-15及4.0mg/mL的Ca(OH)2各2mL,加入菌液后于37℃厌氧环境下恒温培养168小时,每隔24小时取0.1mL液体另作厌氧培养24小时,记录菌落数,观察7个不同时间SA-NH2-SBA-15、SA-SBA-15及Ca(OH)2的抑菌效果。所得结果使用SPSS18.0数据统计分析软件进行统计分析。
  结果:
  1、氨基改性后的NH2-SBA-15仍与改性前的SBA-15保持一致的孔道结构,改性前后的介孔硅材料均适合装载药物;负载七叶皂苷钠后,SA-NH2-SBA-15及SA-SBA-15仍有规则的孔道结构,粒径分布均匀。改性前的SBA-15的载药量为18.01%,氨基改性后的NH2-SBA-15载药量为27.72%,改性后的载药量明显高于改性前,差异具有统计学意义(p<0.05);从不同时间的累计缓释量看,在48到96小时,SA-NH2-SBA-15的累计缓释量比SA-SBA-15低,差异具有统计学意义(p<0.05),但前者的缓释时间比后者长。
  2、液体稀释法实验结果显示:SA-NH2-SBA-15的MIC为3.5mg/mL, MBC为4.0mg/mL; SA-SBA-15的MIC为3.5mg/mL,MBC为4.0mg/mL, Ca(OH)2的MIC为4.0mg/mL,MBC为4.5mg/mL,MIC值与MTT比色法所得结果相同。
  3、SA-NH2-SBA-15和SA-SBA-15药物浓度在2.5mg/mL及以上时,以及Ca(OH)2浓度在3.0mg/mL及以上时,三者均对粪肠球菌有一定的抑制作用。
  当三组(SA-NH2-SBA-15、SA-SBA-15和Ca(OH)2组)浓度大于最低抑菌浓度时,各组组内随浓度增大,抑菌圈增大,差异具有统计学意义(p<0.05)。
  在一定的相同浓度下(4.0mg/mL组、4.5mg/mL组和5.0mg/mL组),三组药物抑菌圈大小比较:SA-SBA-15>SA-NH2-SBA-15> Ca(OH)2,其差异具有统计学意义(p<0.05)。
  4、3.5mg/mL的SA-NH2-SBA-15在24小时至144小时内,各组内菌落数随时间增加而减少,差异具有统计学意义(p<0.05);3.5mg/mL的SA-SBA-15在24小时至96小时内,各组内菌落数随时间增加而减少,差异具有统计学意义(p<0.05);在72至168小时,SA-NH2-SBA-15与SA-SBA-15的菌落数明显少于氢氧化钙,差异具有统计学意义(p<0.05);在96小时后,SA-NH2-SBA-15的菌落数明显少于SA-SBA-15,差异具有统计学意义(p<0.05);4.0mg/mL的氢氧化钙在120小时前菌落数保持稳定,在120小时后菌落数明显增加。
  结论:
  1、改性前的介孔硅材料SBA-15与改性后的NH2-SBA-15都具有装载及缓释药物的能力,NH2-SBA-15的载药能力、缓释药物的时间优于SBA-15。
  2、体外抗菌实验说明,SA-NH2-SBA-15、SA-SBA-15及氢氧化钙对粪肠球菌具有一定的抗菌作用。SA-NH2-SBA-15、SA-SBA-15的抑菌效果优于氢氧化钙;
  3、SA-NH2-SBA-15与SA-SBA-15对粪肠球菌的抑菌抗菌能力优于氢氧化钙,SA-NH2-SBA-15对粪肠球菌的药效长于SA-SBA-15及氢氧化钙。

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