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【6h】

天麻遗传分化与天麻素含量的相关性及其DNA分子标记的研究

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论文说明:英文缩写词简表

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摘要

前言

实验技术路线

第一章天麻遗传分化与系统分类研究

1.1材料与方法

1.1.1材料、试剂与仪器

1.1.2方法

1.2结果与分析

1.2.1天麻基因组DNA的提取

1.2.2天麻基因组的DNA含量

1.2.3RAPD扩增条件优化及参数确定

1.2.4引物筛选

1.2.5天麻基因组DNA多态性的PARD测定

1.2.6天麻样本间RAPD标记共享度和遗传距离系数的计算

1.2.7遗传相似性聚类分析与系统分类

1.3讨论

第二章天麻有效成分天麻素含量的高效液相色谱测定

2.1材料与方法

2.1.1材料

2.1.2仪器与试剂

2.2.1天麻有效成分的高效液相色谱指纹图

2.2.2天麻素含量测定

2.3讨论

第三章天麻DNA分子标记研究

3.1材料与方法

3.1.1材料

3.1.2方法

3.2结果与分析

3.2.1扩增DNA片段的回收

3.2.2回收DNA的克隆与鉴定

3.2.3克隆DNA的测序

3.2.4 DNA序列的生物信息学分析

3.2.5 DNA序列的国际基因数据库登记注册

3.2.6 DNA分子标记序列的验证

3.3讨论

第四章天麻遗传分化、DNA分子标记和天麻素含量的相互关系分析

4.1材料与方法

4.1.1材料

4.1.2方法

4.2结果

4.2.1天麻遗传类群与天麻素含量的关系

4.2.2 DNA分子标记与各个天麻样本及其天麻素含量的关系

4.3讨论

结论

参考文献

致谢

附录

1、综述: 天麻的研究进展

2、攻读博士学位期间主要的研究成果

展开▼

摘要

本研究采用植物DNA提取试剂盒从天麻块茎中提取基因组DNA,并测定其含量;应用随机扩增多态DNA方法研究了天麻基因组DNA多态性;建立了RAPD扩增条件快速优化方法。结果表明:天麻基因组DNA具有多态性;该RAPD扩增条件优化方法是一种简便、快捷、经济、实用的方法,运用该方法进行RAPD扩增,可获得清晰稳定的DNA指纹图谱。  本文应用数学公式计算了样本间的RAPD标记共享度和遗传距离系数,探索了遗传距离系数与天麻茎杆颜色和来源地的关系。结果表明:绿杆天麻L2与L3的遗传距离系数最小,遗传关系最近;红杆天麻H4与绿杆天麻L3的遗传距离系数最大,遗传关系最远;遗传距离系数与天麻茎杆颜色和来源地存在明显的相关性。  本实验研究分析了天麻遗传类群和DNA分子标记与天麻素含量的关系。结果表明:天麻遗传类群与天麻素含量存在明显的相关性。由H1、H2、H3和L1组成的类群所含天麻素平均量最高,与其它类群的差异极显著。DNA分子标记与天麻素含量也存在一定的相关性,其中DNA序列2是天麻素含量高的天麻遗传类型所特有的分子标记。DNA序列1是所研究的全部天麻样本共有的特异DNA分子标记。它们可用于天麻的真伪鉴别、品种鉴定、基因分型和品种选优选育等。

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