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第一章绪论
第一节、植物基因工程研究概况
一、植物基因工程研究概况及其缺陷
二、发展转基因大豆的意义
第二节、去除选择标记基因的策略
一、共转化系统
二、同源重组
三、MAT(Multi-auto-transformation)载体系统
四、位点特异性重组系统
五、转座子系统
第三节pX6-GFP载体的研究概况
第二章材料与方法
一、实验材料
(一)实验菌株
(二)质粒
(三)植物材料
(四)主要试剂
(五)主要仪器
二、实验方法
(一)培养基的配制
(二)抗生素的配制
(三)质粒DNA提取方法
(四)植物基因组提取方法
(五)聚合酶链式反应
(六)质粒、PCR产物的酶切体系
(七)酶切片段去磷酸化
(八)连接与转化
(九)外源基因在大豆中的表达
第三章结果与分析
一、目的质粒的构建
(一)中间质粒pN-GFP的构建
(二)含大豆种子特异性启动子表达载体p952-GFP的构建
二、转基因大豆的获得
(一)转基因大豆的组织培养
(二)质粒在大豆中的表达
三、去除选择性标记植株的获得
第四章讨论
一、目的质粒的构建
二、转基因大豆的获得
三、去除选择性标记植株的获得
结 论
参考文献
附录
致谢
东北师范大学;