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【6h】

位阻型二胺与功能二羧酸为配体的抗肿瘤铂(Ⅱ)配合物研究

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摘要

第一章 铂类抗肿瘤配合物相关研究进展

1.1 顺铂类抗肿瘤铂配合物

1.2 顺铂类抗肿瘤药物的抗癌机理

1.3 顺铂类抗癌药物耐药机制

1.4 具有空间位阻的铂(Ⅱ)配合物

1.5 功能型二羧酸为离去基团的铂(Ⅱ)配合物的研究发展

1.5.1 环丁二酸衍生物为离去基团的铂(Ⅱ)配合物

1.5.2 丙二酸衍生物为离去基团的铂(Ⅱ)配合物

1.6 选题依据和目的

1.6.1 载体配体的选择

1.6.2 离去基团的选择

第二章 含功能二羧酸的位阻型铂(Ⅱ)配合物研究

2.1 实验试剂及仪器

2.2 配体的制备

2.3 铂(Ⅱ)配合物的设计

2.3.1 环丁二羧酸衍生物为离去基团的铂(Ⅱ)配合物

2.3.2 丙二酸衍生物为离去基团的铂(Ⅱ)配合物

2.4 铂(Ⅱ)配合物的制备及表征

2.4.1 羰基环丁二酸为离去基团的铂(Ⅱ)配合物

2.4.2 丙二酸衍生物为离去基团的铂(Ⅱ)配合物

2.5 铂(Ⅱ)配合物的体外抗肿瘤生物活性研究

2.5.1 羰基环丁二羧酸为离去基团的铂(Ⅱ)配合物

2.5.2 丙二酸衍生物为离去基团的铂(Ⅱ)配合物

2.6 典型铂(Ⅱ)配合物的初步抗肿瘤机制研究

2.6.1 铂(Ⅱ)配合物与DNA的相互作用

2.6.2 铂(Ⅱ)配合物的细胞凋亡研究

2.6.3 铂(Ⅱ)配合物的细胞周期研究

2.6.4 铂(Ⅱ)配合物在HepG2细胞中的摄取

2.6.5 铂(Ⅱ)配合物的细胞免疫印迹蛋白研究

第三章 全文总结

致谢

参考文献

作者攻读硕士期间发表论文

附录

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摘要

本文设计合成了两个系列的以功能二羧酸为离去基团的位阻型铂(Ⅱ)配合物,包括1)以N-烷基单取代的1R,2R-环己二胺为载体基团,环丁二酸衍生物(3位上引入羰基)为离去基团的铂(Ⅱ)配合物;2)以2-丁基、环戊基和环己基单取代的1R,2R-环己二胺为载体基团,丙二酸衍生物(2位上引入甲基、乙基和苄基)为离去基团的铂(Ⅱ)配合物。所有合成的铂(Ⅱ)配合物均经红外光谱、核磁共振氢谱和碳谱以及质谱等确认了结构。
  体外抗肿瘤活性表明配合物1-7中除了2-戊基单取代的配合物5具有中等活性之外其他配合物的活性均不明显。离去基团的改变对配合物的细胞毒活性影响较大,羰基的引入使得配合物解离速率降低,脂溶性的单取代烷基配体使得水溶性大大降低,最终导致配合物活性不高。与已报道的42和43相比,载体基团的空间位阻对提高配合物的细胞毒活性没有明显帮助,只有具有合适位阻的2-戊基能导致一定的活性。配合物8a-10c中,配合物8a-9c对四种测试的肿瘤细胞表现出中等到好的的体外细胞毒活性。其中分别经甲基和乙基修饰2-丙二酸为离去基团形成的配合物8b和9a与配合物前体相比,活性得到了很大的改善,尤其是9a,在HepG2细胞中的活性高于顺铂和奥沙利铂,IC50值达3.04μM。丙二酸的2位引入不同的烷基基团可以调节铂配合物的油水平衡,使得配合物更易通过细胞膜到达靶点DNA,从而表现出较好的抗增殖作用。
  对在HepG2细胞中活性最好的化合物9a开展了相关机制研究。琼脂糖凝胶电泳实验显示9a与DNA的作用方式不同于顺铂,可能是9a的环戊基空间位阻导致的,表明9a可能具有与顺铂不同的作用机制。细胞周期和凋亡研究表明9a诱导细胞凋亡通过使大量细胞阻滞在G2期。摄取研究显示9a在HepG2细胞中的Pt含量高于顺铂,9a可能比顺铂更易进入细胞而表现出优异的活性。WesternBlot结果表明9a诱导的凋亡在某种程度上可能是由线粒体依赖的凋亡路径导致的。

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