可诱导性共刺激分子（ICOS）单抗对T细胞诱导的胰岛细胞凋亡及胰岛功能影响的研究

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目的：探讨可诱导性共刺激分子(ICOS)单抗对T细胞诱导的胰岛细胞凋亡及胰岛功能的影响。方法：采用细胞裂解法，提取大鼠T淋巴细胞，进行纯化及鉴定后，将ICOS单抗与RINm5f细胞及T淋巴细胞共育12h、24h、48h。(1)流式细胞仪检测RINm5f细胞的凋亡率；(2)分别提取48h时间点RINm5f细胞总RNA，运用RT-PCR技术分别检测凋亡相关基因BAX、Bcl-2及凋亡途径基因FAS、TRAIL、Tnfrsfla、TRADD、FADD、Caspase8的表达水平；(3)提取48h时间点RINm5f细胞总RNA，运用RT-PCR技术分别检测胰岛细胞胰岛素1(INS1)、胰岛素2(INS2)基因及胰岛细胞转录因子PDX-1、PAX-6、NKX2.2、Ngn3、NeuroD1基因表达的变化。结果：(1)T细胞可增加RINm5f细胞的凋亡率；与ICOS单抗共育后，胰岛细胞的凋亡率明显下降；ICOS单抗与γ干扰素抗体联用后，胰岛细胞的凋亡率下降更明显；(2)与ICOS单抗共育后，RINm5f细胞凋亡基因BAX的表达量下降，而抗凋亡基因Bcl-2的表达则显著增加；(3)ICOS单抗可明显降低FAS、TRAIL、Tnfrsfla、TRADD、FADD和Caspase8基因的表达。(4)T细胞与RINm5f细胞共育后，胰岛细胞INS1、INS2及PDX-1表达量下降，其他转录因子Neurod、NKX2.2、PAX-6、、Ngn表达量无明显变化，加入ICOS单抗后，INS1、INS2及PDX-1基因的表达量增加，但对胰岛细胞其他转录因子的表达无影响。结论：(1)ICOS单抗可减少T细胞诱导的胰岛细胞的凋亡，该保护作用可能与ICOS单抗抑制凋亡基因BAX，促进抗凋亡基因Bcl-2的表达有关；(2)ICOS单抗可抑制T细胞诱导的胰岛细胞的凋亡，至少通过三条途径，即FAS/FAS-L途径，TNF/TNFR1途径和TRAIL/TRAILR途径。(3)ICOS单抗可促进T细胞诱导的胰岛细胞INS1、INS2及PDX-1基因的表达，对胰岛细胞其他转录因子基因的表达量无明显影响。

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作者
董丽;
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作者单位

南京医科大学;

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授予单位南京医科大学;
学科内分泌学
授予学位硕士
导师姓名刘超;
年度 2006
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原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类免疫细胞生物学;
关键词
T细胞; RINm5f细胞; 共刺激分子单抗; 胰岛功能; 胰岛细胞凋亡;

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