芦荟汁中胶原酶抑制成分的分离纯化与抑制作用研究

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第一章绪论

引言

1.1胶原蛋白与胶原酶简介

1.1.1胶原蛋白

1.1.2胶原酶

1.2胶原酶活性与羟脯氨酸测定方法简介

1.2.1胶原酶活性测定方法

1.2.2羟脯氨酸测定方法

1.3胶原酶抑制剂

1.3.1胶原酶抑制剂的应用价值

1.3.2胶原酶抑制剂的研究进展

1.4 小结

1.5立题依据与主要研究内容

第二章羟脯氨酸化学比色法

2.1基本原理

2.2试剂与仪器

2.3试剂配制

2.4影响因素考察

2.4.1氯氨T氧化时间

2.4.2加热显色时间

2.4.3羟脯氨酸溶液pH值

2.4.4指示剂的干扰

2.4.5抑制剂的干扰

2.5羟脯氨酸含量测定方法

2.5.1实验操作

2.5.2羟脯氨酸标准曲线

2.5.3测定结果的精确度

2.6胶原蛋白中羟脯氨酸含量的测定方法

2.7胶原酶对胶原蛋白降解反应的初步研究

2.7.1基本原理

2.7.2实验操作

2.7.3胶原蛋白加入量和胶原酶液质量浓度

2.7.4反应时间和降解率的关系

2.8胶原酶抑制剂抑制效果测定方法

2.8.1基本原理

2.8.2测定方法

2.8.3结果表示

2.8.4四环素的抑制效果

2.9 小结

第三章胶原酶抑制成分的分离纯化与抑制效果测定

3.1试剂与仪器

3.2已知抑制剂化学结构分析和目标提取物的选择

3.3芦荟、芦荟素和蒽醌苷分离方法简介

3.3.1芦荟

3.3.2芦荟素

3.3.3葸醌苷分离方法

3.4芦荟汁中有效成分的分离提取

3.4.1试剂配制

3.4.2分离提取方法

3.4.3HPLC分析

3.5定性分析

3.5.1 Borntrager’s反应(鉴定羟基蒽醌类化合物)

3.5.2芦荟苷反应

3.5.3硼酸荧光反应

3.5.4醋酸镁反应

3.5.5薄层层析(TLC)

3.6化学结构鉴定

3.6.1 m.p

3.6.2 UV(MeOH)

3.6.3 IR(KBr盐片)

3.6.4 LC-MS

3.6.5 1H NMR(丙酮-d6)

3.7芦荟素、异芦荟素抑制效果测定

3.8小结

第四章抑制机理初步探索和其它植物提取物

4.1 Zn2+螯合理论简介

4.2芦荟素、异芦荟素抑制机理实验

4.3其它具有胶原酶抑制作用的植物提取物

4.3.1芍药粗提取物

4.3.2川芎粗提取物

4.3.3抑制效果测定

4.4小结

第五章总结与展望

致谢

参考文献

作者在攻读硕士学位期间发表的文章

附录