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水酶法提取玉米胚芽油和纳滤技术回收蛋白质

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第一章绪论

第二章玉米胚芽水酶法提油工艺

第三章水酶法提油工艺对玉米胚芽油酸价的影响

第四章水酶法提油工艺蛋白质性质的研究

第五章纳滤技术回收水解蛋白质

主要结论

致谢

参考文献

攻读硕士期间发表的论文

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摘要

玉米胚芽水酶法提油工艺在国内外很多文献都有相关报道，但是使用酶的品种多、酶添加量大、反应周期长而且提油率较低，这些因素限制了水酶法提油工艺的工业化推广。本论文确定了玉米胚芽水酶法提油工艺路线，在此基础上，运用纳滤技术回收水解蛋白质，并对蛋白质的性质进行了研究。 论文首先确定并优化了水酶法提取玉米胚芽油工艺，玉米胚芽以1：6(w/v)的比例浸泡于0.01mol/L的柠檬酸缓冲液中，在蒸汽消毒器中进行热处理，110℃控温1h，沥干后按照干物质与清水比例为1:4(w/v)，经砂轮磨磨浆后得到玉米胚芽浆料物质，同时加入2％(w/w)酸性蛋白酶和1.5％(w/w)纤维素酶，控制酶解温度40℃2h至50℃8h，酶解完成后升温至80℃灭酶15min，离心得到游离油、乳状液、酶解液和残渣，游离油得率为93.7％。扫描电子显微镜(SEM)分析图表明：玉米胚芽水酶法提油工艺过程中，热处理和酶解过程能够彻底地破坏玉米胚芽组织结构，使其失去对油滴的束缚作用，从而使油脂游离出来。 研究了玉米胚芽水酶法提油工艺对油酸价的影响。玉米胚芽原料中油脂酸价为5.0mgKOH/g，热处理后的玉米胚芽中油脂酸价为5.8mgKOH/g，水酶法提取的玉米胚芽油酸价为14.3mgKOH/g，热处理过程对油的酸价基本没有影响，酶解过程中，酸性蛋白酶在水解玉米胚芽蛋白肽键同时，也参与了水解油脂酯键，释放出游离脂肪酸，大大增加油的酸价，使油的品质下降，这是影响玉米胚芽油酸价偏高主要因素，纤维素酶对油脂酸价影响不大。 浸泡液中蛋白质等电点pI值为5.5，浸泡液pH为4.0，因此，浸泡液中蛋白质溶出率较高，浸泡液干燥样品中的蛋白质含量达到18.48％。乳状液中蛋白质SepharoseCL-6B凝胶色谱洗脱峰有3个，其相对分子质量主要集中在305,562、120,254、75,440，其中相对分子质量在120,254的组分是乳状液中蛋白质的主要组成部分，而相对分子质量在305,562的组分所占比例较低，相对分子质量不同的蛋白质，其乳化性能也不尽相同。 采用NF200-2540纳滤膜，通过浓缩模型回收浸泡液和水解液中蛋白质和小肽。纳滤过程中，酶解液和浸泡液浓缩效果显著，可以达到3倍以上的浓缩效果，但脱盐和去糖效果不理想。浸泡液和酶解液钠滤前后干燥样品高效液相色谱(HPLC)图谱表明：浸泡液经纳滤后，相对分子质量在1000以上的蛋白质含量有所上升，相对分子质量低于200左右的小肽有明显的损失；酶解液经纳滤后，相对分子质量在200～500的小肽占主要部分.

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