线粒体功能与猪精子活力的关系及胞外ATP的调节作用

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摘要

缩略词

引言

第一章精子活力的调节机制研究现状

1．2精子活力

2．1能量产生途径

2．2精子糖酵解产生ATP的过程

2．3精子氧化磷酸化产生ATP的过程

2．4不同物种精子能量代谢方式

3胞外ATP在精子活力调节中的作用

3．1胞外ATP来源和作用方式

3．2胞外ATP提高精子活力的作用机制

3．3胞外ATP对精子受精过程的影响

4糖原合成激酶在精子活力调节中的作用

4．1糖原合成激酶参与精子活力的调节

4．2胞外ATP对糖原合成激酶活性的调节

5公猪精子能量代谢方式

第二章精子中线粒体的功能和命运

1．1线粒体形态

1．2线粒体膜电位

1．3线粒体和mtDNA含量

2精子中线粒体功能

2．1线粒体参与钙离子(Ca2+)稳态

2．2线粒体可以调控精子凋亡

2．3线粒体可以参与精子获能

3．1母系遗传

3．2受精前精子线粒体丢失

3．3受精后精子线粒体丢失

第三章线粒体DNA含量、线粒体活性和猪精子活力之间的关系

1材料与方法

1．1主要试剂和仪器

1．2主要溶液

1．3精子样品的收集

1．4不同活力精子的分离

1．5精子线粒体含量检测

1．6精子mtDNA拷贝数检测

1．7电镜观察精子线粒体超微结构

1．8精子线粒体膜电位检测

1．9精子线粒体中ROS含量

1．10线粒体呼吸链复合物I活性检测

1．11精子活力检测

1．12免疫印迹检测精子蛋白表达

1．13数据分析以及统计

2结果与分析

2．1不同活力精子中线粒体含量和mtDNA拷贝数

2．2不同活力精子线粒体结构和活性

2．3 OXPHOS在猪精子活力中的作用

2．4不同活力精子中线粒体ROS含量

2．5不同活力精子中OXPHOS相关蛋白水平

2．6不同活力精子自噬水平的比较

3讨论

第四章胞外ATP调节猪精子活力的作用

1材料与方法

1．1主要试剂、溶液和仪器

1．2样品来源和收集

1．3样品处理

1．4精子活力检测

1．5精子凋亡检测

1．6精子总蛋白提取和免疫印迹检测

1．7精子ATP含量和ADP：ATP相对比值

1．8精子线粒体膜电位检测

1．9精子ATP合成酶和线粒体复合物IV活性检测

1．10肌酸激酶和丙酮酸激酶活性检测

1．11乳酸含量和丙酮酸含量检测

1．12乳酸脱氢酶活性检测

1．12数据分析及统计

2结果与分析

2．1胞外ATP对精子活力、凋亡和GSK3a磷酸化的影响

2．2胞外ATP对精子ATP含量的影响

2．3胞外ATP对精子线粒体功能和肌酸激酶活性的影响

2．4胞外ATP对精子丙酮酸激酶、丙酮酸和乳酸的影响

2．5胞外ATP对精子乳酸脱氢酶活性的影响

3讨论

全文总结

参考文献

致谢

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