声明
论文说明
摘要
常用缩略语
第一章 文章综述
1 骨骼肌卫星细胞
1.1 动物肌肉生成概述
1.2 卫星细胞的体外分离培养方法
1.3 卫星细胞的纯化
1.4 骨骼肌卫星细胞的鉴定
1.5 肌卫星细胞的遗传调控与信号传导通路
2 Wnt/β-catenin信号通路概述
2.1 Wnt蛋白
2.2 Wnt信号在成脂中的作用
2.3 Wnt信号在成肌过程中的作用
3 miRNA概述
3.1 miRNA的成熟和作用机制
3.2 miRNA和siRNA的区别
3.3 miRNA在骨骼肌、Wnt通路和脂肪组织中的研究
第二章 牛骨骼肌卫星细胞原代培养以及鉴定
1 材料与方法
1.1 实验地点和时间
1.2 实验动物
1.3 主要酶和试剂
1.4 主要仪器
2 试验方法
2.1 骨骼肌卫星细胞的分离培养
2.2 骨骼肌卫星细胞的纯化、传代
2.3 骨骼肌卫星细胞诱导分化
2.4 骨骼肌卫星细胞鉴定
3 结果与分析
3.1 牛骨骼肌卫星细胞形态学鉴定
3.2 骨骼肌卫星细胞诱导分化
3.3 细胞免疫化学检测骨骼肌卫星细胞标志性基因表达
4 讨论
第三章 骨骼肌卫星细胞成脂诱导中Wnt/β-catenin信号相关miRNA表达谱研究
1 材料与方法
1.1 试验地点和时间
1.2 实验动物
1.3 试剂
1.4 主要仪器
2 试验方法
2.1 实验分组及处理
2.2 RNA提取
2.3 骨骼肌卫星细胞miRNA微阵列分析
2.4 cDNA合成反应
2.5 qRT-PCR
2.6 miRNA靶基因预测以及GO注释和KEGG信号通路富集分析
2.7 数据分析
3 结果与分析
3.2 总RNA提取质量控制
3.3 芯片杂交与扫描
3.4 芯片检测结果
3.5 芯片结果验证
3.6 差异表达的miRNAs GO和KEGG分析
4 讨论
全文结论
参考文献
致谢