靶向猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白NSP12的shRNA抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒在Marcl45细胞中复制

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摘要

英文缩写词表

第一章 猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究进展

1．1 猪繁殖与呼吸综合征的发现

1．2 猪繁殖与呼吸综合征病毒的形态学特征

1．3 猪繁殖与呼吸综合征病毒的分子生物学特征

1．4 猪繁殖与呼吸综合征病毒的流行病学

1．5 猪繁殖与呼吸综合征病毒的临诊症状和病理变化

1．6 猪繁殖与呼吸综合征病毒的致病机制

1．7 猪繁殖与呼吸综合征病毒的诊断方法

1．7．1 病毒分离

1．7．2 血清学诊断

1．7．3 分子生物学诊断

参考文献

第二章 RNA干扰的研究进展

2．1 RNA干扰的发现及发展

2．2 RNA干扰的机理研究

2．2．1 起始阶段

2．2．2 效应阶段

2．3 RNA干扰的设计方法

2．4 RNA干扰的应用研究

2．4．1 RNAi在基因调节功能中的应用

2．4．2 RNAi在病毒感染的预防及治疗中的应用

2．4．3 RNAi在肿瘤治疗中的应用

2．5 RNA干扰的问题与进展

参考文献

第三章 PRRSV NSP12 shRNA抑制PRRSV在Marc145细胞中复制的研究

3．1 实验材料

3．1．1 菌株、载体、病毒及细胞

3．1．2 主要试剂

3．1．3 仪器和设备

3．2 试验方法

3．2．1 设计shRNA

3．2．2 重组载体的构建

3．2．3 细胞培养

3．2．4 Marc-145细胞的共转染

3．2．5 Marc-145细胞的转染

3．2．6 Marc-145细胞感染PRRSV

3．2．7 流式细胞术

3．2．8 实时荧光定量-PCR

3．2．9 Western blot分析

3．3 试验结果

3．3．1 重组载体的构建

3．3．2 shRNA抑制PRRSV nsp12蛋白的表达

3．3．3 shRNA抑制PRRSV在Marc-145细胞上的细胞病变

3．3．4 shRNA减少PRRSV在Marc-145细胞上的感染率

3．3．5 shRNA可抑制PRRSV亚基因组基因转录

3．3．6 shRNA可抑制PRRSV亚基因组基因翻译

3．4 讨论

参考文献

全文总结

附录

致谢