绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯对结直肠癌作用的体外研究

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【目的】：探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin-3-gallate，EGCG）对结直肠癌细胞增殖的抑制作用及其作用机理。
　　【方法】：体外培养结直肠癌细胞（LoVo细胞、SW480细胞、HT29细胞、HCT-8细胞），采用不同浓度的EGCG(10mg/L、20mg/L、35mg/L)对其进行干预，MTT法检测EGCG对结直肠癌细胞增殖的抑制作用；用流式细胞仪检测EGCG对结直肠癌细胞凋亡和细胞周期的影响；实时荧光定量PCR检测EGCG干预后的结直肠癌细胞的Notch1、Notch2、HES1、JAG1基因的表达情况；Westernblot检测EGCG干预后的结直肠癌细胞的Notch1、Notch2、HES1、JAG1蛋白的表达情况。
　　【结果】：MTT法检测EGCG对结直肠癌细胞的增殖具有抑制作用。EGCG对结直肠癌细胞的增殖抑制作用具有剂量依赖性，并且对HT29细胞的增殖抑制作用具有时间依赖性。流式细胞仪检测EGCG能增强结直肠癌细胞的凋亡率，且剂量与细胞凋亡率呈正相关，实验组(35mg/L)与对照组(0mg/L)相比，有统计学意义。EGCG能将SW480细胞和LoVo细胞细胞周期阻滞在G0/G1期，阻碍其向S期转入，将HCT-8细胞阻滞在G2/M期，阻碍其向M期转入，将HT29细胞阻滞在S期，阻碍其向G2期转入，抑制结直肠癌细胞的增殖。实时荧光定量PCR检测EGCG能上调结直肠癌细胞的Notch1基因的表达，下调Notch2、JAG1和HES1基因的表达；Westernblot检测EGCG能上调结直肠癌细胞的Notch1蛋白的表达，下调Notch2蛋白的表达，对HES1和JAG1蛋白的表达有下调趋势，但均没有统计学意义(p＞0.05)。
　　【结论】：EGCG对体外培养的结直肠癌细胞的增殖有明显抑制作用，其作用机制与诱导细胞凋亡和影响细胞周期，上调Notch1基因的表达，下调Notch2、JAG1和HES1基因的表达及上调Notch1蛋白的表达和下调Notch2蛋白的表达有关。

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作者
张春霞;
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作者单位

南京中医药大学;

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授予单位南京中医药大学;
学科中医外科
授予学位硕士
导师姓名金黑鹰;
年度 2012
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类肠肿瘤;中草药疗法;
关键词
表没食子儿茶素没食子酸酯; Notch信号转导途径; 结直肠癌; 细胞增殖; 抑制作用;

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