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鲤疱疹病毒II型的DNA疫苗、卵黄抗体的研制及鱼卵中鲤疱疹病毒II型的检测技术

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第一章 文献综述

1鲤疱疹病毒II型的研究进展

1.1 CyHV-2的症状及流行规律

1.2形态特征

1.3 CyHV-2的基因组及其编码的蛋白

1.4 CyHV-2的免疫学效应

1.5 CyHV-2免疫防治的研究

2.家蚕杆状病毒及其表达系统

2.1家蚕杆状病毒表达系统的构建

2.2家蚕杆状病毒表达系统的优点与缺陷

2.3利用杆状病毒作为表达载体的疫苗研究

3.卵黄抗体的研究进展

3.1卵黄抗体的概念、理化与生物学特性

3.2 卵黄抗体的应用

4.鲤疱疹病毒(CyHV-2)在亲代与子代间的垂直传播

4.1.鱼类病原体垂直传播途径的研究进展

参考文献

第二章 研究目的与研究内容

1.研究目的与意义

2.研究的主要内容

2.1 ORF72、ORF66杆状病毒表面展示疫苗的构建

2.2 CyHV-2ORF72-ORF81-ORF66-ORF82联合DNA疫苗的构建及免疫效果评估

2.3 CyHV-2ORF72卵黄抗体的制备

2.4 异育银鲫卵中CyHV-2的检测

3.技术路线

第三章 CyHV-2 ORF72 与ORF66杆状病毒表面展示疫苗的构建与免疫效果评估

1材料与方法

1.1实验材料

1.2实验方法

2.结果与分析

2.1 BmNPV-P10-GP64-ORF72与BmNPV-P10-GP64-ORF66

2.2 BmNPV-P10-GP64-ORF72与BmNPV-P10-GP64-ORF66注射免疫鱼

3讨论

参考文献:

第四章 CyHV-2 ORF72-ORF81-ORF66-ORF82联合DNA疫苗的构建及免疫效果

1材料与方法

1.1实验材料

1.2实验方法

2结果与分析

2.1多抗原表位联合DNA疫苗的设计与序列合成

2.2核酸疫苗载体的构建与鉴定

2.3疫苗基因在鱼组织细胞中的表达

2.4 BmNPV-FA-D4ORF注射免疫鱼的抗体效价检测

2.5 BmNPV-FA-D4ORF免疫注射对CyHV-2感染的免疫保护作用

2.6 BmNPV-FA-D4ORF免疫注射后在鱼体内的滞留周期

2.7 口服免疫鲫抗CyHV-2的免疫保护作用

2.8浸泡免疫后鱼体内疫苗基因的表达

3.讨论

参考文献

第五章 鲤疱疹病II型病毒ORF7

1 材料与方法

1.1实验材料

1.2实验方法

2.结果与分析

2.1重组蛋白的鉴定

2.3重组蛋白的纯化

2.4卵黄抗体的特异性和效价检测

3.讨论

参考文献

第六章 异育银鲫鳃出病鱼卵中的CyHV-2的检测

1材料与方法

1.1材料

1.2实验方法

2结果与分析

2.1异育银鲫鳃出血病不同组织中CyHV-2的PCR定性检测

2.2异育银鲫鳃出血病主要脏器CyHV-2的检测

2.3 异育银鲫的鱼卵中带毒率的检测以及单个鱼卵中带毒量的检测

2.4 不同发病程度与卵中CyHV-2的带毒水平。

3.讨论

参考文献

结 论

附录一 常用仪器

附录二 载体图谱

附录三 RT-PCR原始数据

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致 谢

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