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右美托咪定经胆碱能抗炎通路调控胫骨折断大鼠的脑内炎症反应的研究

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目的：探究右美托咪定对外周手术创伤(胫骨折断术)造成的脑组织无菌性炎症反应的影响及机制。
　　方法：本实验分为两部分
　　第一部分：健康雄性SD大鼠40只，6～8周龄，体重200～220g，采用随机数字法，将其分为五组（n=8）：对照组（C组），胫骨折断手术组（S组），右美托咪定+胫骨折断组（DS组），右美托咪定+单侧迷走神经切断+胫骨折断组（VDS组），单侧迷走神经切断+胫骨折断组（VS组）。S组，DS组，VS组，VDS组采用开放性胫骨骨折手术模拟脑内无菌性炎症反应，C组，S组，VS组在手术前15min腹腔注射生理盐水1ml；DS组，VDS组术前15min腹腔注射右美托咪定50μɡ/kg（溶于1ml生理盐水中）；VS组，VDS组术前切断左侧迷走神经，其余各组均暴露左侧迷走神经。
　　第二部分：健康雄性SD大鼠40只，6～8周龄，体重200～220g，同样将其随机分为五组（n=8）：对照组（C组），胫骨折断手术组（S组），右美托咪定+胫骨折断组（DS组），右美托咪定+甲基牛扁碱+胫骨折断组（MDS组），甲基牛扁碱+胫骨折断组（MS组）。甲基牛扁碱为α-7乙酰胆碱能受体拮抗剂。除C组外，其余各组行开放性胫骨折断术，C组、S组在手术前15min及30min腹腔注射生理盐水1ml；DS组术前30min腹腔注射生理盐水1ml，术前15min腹腔注射右美托咪定50μɡ/kg（溶于1ml生理盐水中），MDS组术前30min腹腔注射甲基牛扁碱40μɡ/kg（溶于1ml生理盐水中），术前15min腹腔注射右美托咪定50μɡ/kg（溶于1ml生理盐水中），MS组术前30min腹腔注射甲基牛扁碱40μɡ/kg（溶于1ml生理盐水中），术前15min腹腔注射生理盐水1ml。
　　在手术后24h处死大鼠，取出海马组织，运用ELISA的方法检测各组大鼠海马组织中TNF-ɑ，IL-1β的含量，采用免疫荧光的方法对NF-κB进行蛋白定性及半定量检测，用western blotting的方法对NF-κB、GFAP、CD11b进行蛋白定量检测。
　　结果：
　　第一部分：外周手术创伤胫骨折断术可以导致脑内海马炎性介质TNF-ɑ，IL-1β及NF-κB、GFAP、CD11b表达明显增高（P<0.05），右美托咪定预处理可以抑制炎性因子TNF-ɑ，IL-1β及NF-κB、GFAP、CD11b的表达（P<0.05），当切断迷走神经后右美托咪定的脑内抗炎作用被反转，表现为VDS、VS组与DS组相比TNF-ɑ，IL-1β及NF-κB、GFAP、CD11b的表达明显增高（P<0.05）。
　　第二部分：S组与C组相比TNF-ɑ，IL-1β及NF-κB、GFAP、CD11b表达明显增高（P<0.05），DS组与S组相比TNF-ɑ，IL-1β及NF-κB、GFAP、CD11b表达明显减少（P<0.05），MDS、MS组与DS组相比TNF-ɑ，IL-1β及NF-κB、GFAP、CD11b的表达明显增高（P<0.05）。
　　结论：右美托咪定可以减轻胫骨折断大鼠术后的脑内炎症反应，依赖于迷走神经及胆碱能受体的胆碱能抗炎通路为其抗炎作用的可能机制。

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