重组干扰素诱导蛋白-10对人视网膜毛细血管内皮细胞作用的研究

代理获取

页面导航

目录
摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

背景与目的：
　　糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy,DR）、视网膜中央静脉阻塞（central retinal vein occlusion,CRVO）、早产儿视网膜病变（retinopathy of prematurity,ROP）等多种视网膜相关疾病与新生血管的发生有密切联系。当这些新生血管发生渗漏、出血、纤维增生而造成视网膜水肿、视网膜玻璃体出血或牵引视网膜脱离时，则可以导致视力下降或丧失。血管新生是一个相当复杂的过程，由已形成的血管内皮细胞冲破血管壁的基底膜，迁移、增殖和连接组成新的血管。一些研究结果表明，重组干扰素诱导蛋白-10（interferon-inducible protein-10,IP-10）能够与CXC趋化因子受体3（chemokine receptor 3,CXCR3）结合发挥抗血管作用，并且人的多种血管内皮细胞均不同程度地表达CXCR3。IP-10抑制视网膜新生血管生成作用已有报道，但对内皮细胞作用的具体机制目前尚不清楚。本研究旨在通过检测IP-10对人视网膜毛细血管内皮细胞（human retinal microvascular endothelial cells,HREC）增殖、迁移和管腔形成能力的影响，并以人脐静脉血管内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVEC）作为参照，探讨其抑制视网膜新生血管生成的途径及特异性作用，以期对视网膜新生血管的研究提供新的理论依据及治疗靶点。
　　材料与方法：
　　1、常规消化HREC和HUVEC，分别收集约1×106个细胞，以逆转录-聚合酶链反应（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR）方法检测两种细胞CXCR3 mRNA的表达情况。
　　2、分别收集HREC和HUVEC，调整细胞浓度至5000个/100μl，以每孔100μl接种于96孔板，以不同浓度IP-10（0，10，100,1000ng/ml）作用于孔内细胞24h后，每孔加入CCK810μl，37℃，5%CO2孵育箱内继续孵育4h后，酶联检测仪450nm波长处测定吸光度（OD值）。
　　3、HREC和HUVEC两种细胞贴壁生长后，移液枪尖垂直培养板划痕，及时拍照。设置3个IP-10浓度组，干预24 h后再次拍照，软件测量计算细胞加药前后迁移距离。
　　4、根据IP-10浓度分成0ng/ml、10ng/ml、100ng/ml组及1000ng/ml4个组，Matrigel体外三维成型法检测IP-10对HREC和HUVEC管腔形成能力的影响。
　　结果：
　　1、RT-PCR检测结果显示，HREC和HUVEC两个细胞株均在基因水平表达IP-10受体CXCR3。
　　2、CCK-8增殖分析法结果显示IP-10抑制HREC增殖，在0~1000ng/ml范围随浓度增加增殖抑制率有上升趋势（F=6.202，P<0.05），各浓度对HUVEC的增殖均无明显影响（F=1.183，P>0.05）。
　　3、细胞划痕迁移实验中IP-10在剂量10ng/ml和100ng/ml干预时，HREC和HUVEC迁移距离均小于对照组的迁移距离，差异有统计学意义（F=25.373，P<0.05；F=23.858，P<0.05）。
　　4、Matrigel体外三维成型实验中，10、100ng/ml IP-10对HREC完整管腔形成数量无明显影响，1000ng/ml IP-10可使HREC完整管腔形成数量明显减少，差异有统计学意义（F=5.359，P<0.05）。
　　结论：
　　1、HREC和HUVEC二种血管内皮细胞均在基因水平表达CXCR3。
　　2、干扰素诱导蛋白-10对HREC的增殖、迁移及管腔形成均有抑制作用，对HUVEC的迁移有抑制作用。

著录项

作者
肖艳辉;
展开▼
作者单位

苏州大学;

展开▼
授予单位苏州大学;
学科眼科学
授予学位硕士
导师姓名陆培荣;
年度 2013
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类视网膜疾病;发病学;
关键词
重组干扰素诱导蛋白-10; 视网膜毛细血管; 内皮细胞; 迁移距离; 病理特征;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. 重组人PDCD5蛋白对干扰素γ诱导人宫颈癌SiHa细胞凋亡的增敏作用的初步探讨 [J] . 张岱 ,刘朝晖 ,李克敏 . 中国妇产科临床杂志 . 2004,第4期
2. 载脂蛋白M对高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞中相关炎性因子表达的抑制作用 [J] . 唐皖1 ,罗光华2 ,姚霜2 . 中华实验眼科杂志 . 2018,第003期
3. 载脂蛋白M对高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞中相关炎性因子表达的抑制作用 [J] . 唐睆 ,罗光华 ,姚霜 . 中华实验眼科杂志 . 2018,第003期
4. 糖基化低密度脂蛋白诱导的大鼠视网膜微血管内皮细胞凋亡以及根皮苷保护作用的研究 [J] . 张世阳 ,徐修才 ,焦莉莉 . 临床和实验医学杂志 . 2017,第018期
5. 重组人促红细胞生成素体外诱导人脐静脉内皮细胞血管新生作用的实验研究 [J] . 姚晓艳 ,李红戈 . 神经损伤与功能重建 . 2011,第002期
6. 干扰素诱导蛋白IFI16对血管内皮细胞增殖的影响及其机制的初步研究 [C] . 龙向淑 ,吴强 ,宋方 . 第14届中国南方国际心血管病学术会议 . 2012
7. 激肽释放酶结合蛋白抑制高糖诱导的人视网膜毛细血管内皮细胞增殖作用的研究 [A] . 邢茜 . 2016

重组干扰素诱导蛋白-10对人视网膜毛细血管内皮细胞作用的研究

目录

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅