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茶枯饼中茶皂素的毛细管电泳定量及提取新方法研究

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摘要

皂苷是固醇或三萜类化合物的低聚配糖体总称。它广泛存在于植物界以及某些海洋生物中,根据皂苷元的结构分为三萜皂苷和甾体皂苷两大类。茶皂素属于三萜皂苷,在油茶果实和叶中含量很高,是一种天然的表面活性剂,具有抗炎、抗菌、抗氧化功能,能抑制小鼠胃对酒精的吸收。但目前茶皂素生产中存在成本高、产品纯度低等问题,致使茶皂素生产和应用受到限制。本论文主要研究了茶皂素的提取、分离纯化工艺及茶皂素的毛细管电泳定量分析方法。 本论文的研究工作由以下几个部分组成: (1) 茶皂素标准品的制备 首先用微波萃取法提取粗品茶皂素,然后经过AB-8大孔树脂的梯度洗脱,得到其中的60%的乙醇洗脱液,经过化学分析和仪器分析,确定为纯的标准品。可作为茶皂素定量分析的对照品。 (2) 茶皂素定量方法的研究 本论文建立了两种测定茶皂素的方法:紫外可见标准加入法测定茶皂素含量和毛细管电泳法测定油茶枯饼中茶皂素的含量。实验证明,两种方法测定茶皂素含量的结果分别为17.50%、17.83%,RSD分别为1.70%、2.85%,毛细管电泳法测定茶皂素的含量与紫外可见标准加入法相比,操作更简便、速度更快,因而最终作为本文含量测定的方法。 (3)微波辅助提取茶皂素 建立了微波辅助提取茶皂素的方法,优化了各项影响因素,并与传统的醇回流法比较。微波辅助提取茶皂素萃取时间、提取率、产品纯度分别为12.0min、19.74%、61.19%,醇回流时间、提取率、产品纯度分别为9.0h、15.52%、42.07%。实验结果证明微波辅助提取是一种快速高效提取茶皂素的方法,而且茶皂素的得率和纯度都比较高。 (4)索氏提取和大孔树脂联用制备高纯度茶皂素 建立了索氏提取和大孔树脂联用制备高纯度茶皂素的方法。把分离和提取两个过程结合起来,简化了工艺。普通醇法提取茶皂素产品的纯度为42.07%,微波辅助法提取茶皂素产品的纯度为61.19%,而此方法提取茶皂素的纯度为95.31%。

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