银杏黄酮类化合物含量的时空分布研究

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银杏原产于我国，雌雄异株，为珍贵的孑遗植物，被誉为“活化石”，具重要研究价值和利用价值。银杏中类黄酮、萜内酯和聚戊烯醇等次生代谢产物具重要生物活性，其黄酮类化合物含量已成为《银杏种核质量等级》国家标准和国际市场规定的种核和银杏叶提取物EGb产品的重要质量指标。随着银杏核用和叶用生产标准化实施及其产业的快速发展，迫切需要高含量黄酮类化合物的核用和叶用品种进行品种结构改良，以促进银杏产业的提升和可持续发展。本研究选用扬州大学银杏种质资源圃内树势、栽培管理一致的13年生雄株和雌株各15株，其中雌株为核用主栽品种佛指、马铃和圆子类共15株。2013-2014年，各供试植株分别于4、5、6、7、8、9、10月份随机采取100张叶片，7、8、9、10月份各供试核用主栽品种植株随机采取50粒种实，经处理后采用响应面法优化料液比、溶剂浓度、提取时间、提取温度等影响黄酮类化合物含量的主要作用因子形成的最佳提取体系分别提取叶片、种仁、外种皮中芦丁和槲皮素、山奈酚、异鼠李素等黄酮类化合物，采用HPLC测定其含量，并测定分析雌株种核的形态大小及重量、含水量及可溶性糖、淀粉、蛋白质、脂肪等含量。结果表明:
　　1、银杏叶片芦丁提取含量(Y)依料液比(A)、乙醇浓度(B)、提取时间(C)、提取温度(D)作用而变化的回归方程为:Y=+0.94-0.041A+0.055B-9.773*10-3C+0.018D-8.959*10-3AB-0.090AC+0.038AD-0.060BC-0.14B D-0.075CD-0.066 A2-0.079B2-0.11C2-0.30D2(R2=0.9286)，各主要作用因子间存在交互作用。Y响应于各主要作用因子的最佳值分别为:料液比1∶17.11(g∶ml)、乙醇浓度71.92％、提取时间38.93min、提取温度70.24℃，在此条件下，银杏叶片芦丁最佳提取含量可达到0.940767mg/g;
　　2、银杏叶片槲皮素、山奈酚、异鼠李素以乙醇为提取溶剂，优化提取体系为:料液比1∶15、70％的乙醇-25％盐酸4∶1、提取温度80℃、提取时间40min、超声提取次数2次，采用RP-HPLC分别测定其含量，换算成槲皮素苷、山奈酚苷、异鼠李素苷的系数分别为2.51、2.64、2.39，经Hasler的三因子法换算得到叶片黄酮类化合物含量;
　　3、银杏雌雄株叶片的芦丁含量季节变化表现出不同的趋势，即分别由4月份的1.749mg/g和1.699mg/g下降到8月份的0.772mg/g和9月份的0.762mg/g，后出现上升至10月份的1.111mg/g和0.968mg/g。虽雌株的芦丁含量稍高于雄株，但其差异未达到显著水平，故选用叶片高含量黄酮类化合物的雄株作为银杏叶用优质资源更具理论和生产意义;
　　4、银杏叶片的槲皮素、山奈酚、异鼠李素等黄酮苷元含量与黄酮类化合物含量的季节变化基本相同。雌雄株4月份叶片的含量最高，其黄酮类化合物含量分别为4.347mg/g和为3.458mg/g，后均呈下降趋势。而雌株含量分别在6月份和9月份出现峰值，雄株仅在9月份出现峰值。雌雄株间叶片黄酮类化合物、槲皮素及异鼠李素含量差异不显著，而山奈酚含量差异达到显著水平。
　　5、雌株种仁和外种皮黄酮类化合物的含量季节变化相同，两者具有极显著相关（r=0.970**）。其7月份的黄酮类化合物的含量分别为0.01067mg/g和0.09892 mg/g，后下降到9月份出现低谷，其后又开始上升，至10月份采收时其含量分别为0.005306mg/g和0.05460mg/g。
　　6、银杏核用单株JSYX-2、JSYX-4、JSYX-11、JSYX-12、JSYX-13中，其叶片、外种皮、种仁中黄酮类化合物含量差异达到极显著水平，其中JSYX-11叶片中黄酮类化合物含量最高，JSYX-12的种仁及外种皮中黄酮类化合物含量均表现最高。株间种仁中可溶性糖、淀粉、蛋白质、脂肪含量差异均达到极显著水平，其最高分别JSYX-11、JSYX-4、JSYX-13, JSYX-13，分别为4.845％、68.849％、4.354％、5.500％。
　　7、经聚类分析，供试的15株银杏雄株叶片的黄酮类化合物含量可分为4类。第Ⅳ类包括3-9、3-10、9-12、3-1、7-9，其黄酮类化合物含量较高，9月份芦丁、槲皮素、山奈酚、异鼠李素及黄酮类化合物含量的平均值分别为1.0056mg/g、0.3468mg/g、0.4916mg/g、0.2554mg/g和2.2814mg/g，可推荐为银杏叶用优选雄株。
　　8、对供试的15株银杏雌株种仁黄酮类化合物含量进行聚类分析，供试雌株可以分为2类，第Ⅰ类黄酮类化合物含量较高，其包括6-5、9-15、10-1、2-15、4-9。其中第Ⅰ类的平均单粒重为2.236g，平均核长为2.454cm，平均核宽1.643cm，平均核厚1.407cm，平均出核率28.376％，平均出仁率88.018％，总黄酮类化合物平均含量为0.000862％。

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作者
王金艳;
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作者单位

扬州大学;

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授予单位扬州大学;
学科果树学
授予学位硕士
导师姓名陈鹏;
年度 2015
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原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类植物药;化学分析与鉴定;
关键词
银杏; 黄酮类化合物; 含量分布; 生物活性;

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