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43例犬子宫蓄脓细菌分离及子宫壁病理组织学与免疫组化变化的研究

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目录

摘要

符号说明

文献综述

1 犬子宫和卵巢的解剖和组织结构

1.1 卵巢和子宫的解剖结构

1.2 卵巢和子宫的组织结构

2 母犬的发情周期和性激素变化

1.1 初情期

1.2 发情季节

1.3 发情周期和性激素变化

3 子宫蓄脓的分类

3.1 开放型子宫蓄脓

3.2 闭合型子宫蓄脓

4 引起犬子宫蓄脓的常见原因

4.1 年龄、品种和生育史与子宫蓄脓的关系

4.2 子宫颈与子宫蓄脓的关系

4.3 TOLL样受体与子宫蓄脓的关系

4.4 雌激素、孕激素和ER、PR与子宫蓄脓的关系

4.5 细菌与子宫蓄脓的关系

5 病犬的主要组织器官病理学变化

5.1 卵巢病理变化

5.2 子宫病理变化

5.3 其他组织器官的病理变化

6 犬子宫蓄脓的诊断方法

6.1 临床检查

6.2 实验室检查

6.3 影像学检查

7 子宫蓄脓的治疗

7.1 手术治疗

7.2 药物治疗

8 本研究的目的和意义

试验一 犬子宫蓄脓临床病例的调查研究

1 材料

1.1 实验动物

1.2 主要仪器

2 方法

2.1 实验犬基本情况

2.2 血液样本的采集和测定

2.3 影像学检查

2.4 数据处理

3 结果

3.1 子宫蓄脓病例发病情况统计分析

3.2 试验犬血常规及血液生化指标的测定结果

3.3 子宫蓄脓的影像学诊断分析

4 讨论

4.1 犬品种与子宫蓄脓的关系

4.2 发病年龄与子宫蓄脓的关系

4.3 发病季节和发病时间与子宫蓄脓的关系

4.4 生育史与子宫蓄脓的关系

4.5 血液学变化与子宫蓄脓的关系

4.6 子宫蓄脓对肝肾功能的影响

4.7 影像学检查

试验二 犬子宫蓄脓的病理组织学变化及免疫组化观察

1 材料

1.1 实验动物

1.2 主要试验试剂和用品

1.3 主要试验仪器

1.4 相关试剂的配制

2 方法

2.1 组织样本的采集

2.2 石蜡切片的制作

2.3 HE染色

2.4 免疫组化法检测组织中相关蛋白的表达

3 结果

3.1 子宫蓄脓病例的子宫和卵巢病理解剖学特点

3.2 子宫蓄脓病例子宫和卵巢的病理组织学变化

3.3 ER、PR、TLR4和TLR2在犬子宫内膜的表达

4 讨论

4.1 子宫病理组织学变化

4.1 TLR2、TLR4在子宫壁的表达

4.2 ER、PR在子宫壁的表达

试验三 犬子宫蓄脓的细菌分离鉴定

1 材料

1.1 主要试剂

1.2 主要仪器

1.3 主要培养基的配制

2 方法

2.1 子宫脓汁的采集

2.2 细菌涂片检查

2.3 细菌的分离培养

2.4 细菌的鉴定

3 结果

3.1 脓汁涂片的革兰氏染色

3.2 子宫蓄脓细菌鉴定结果

3.3 子宫蓄脓细菌生化试剂鉴定和16S rDNA鉴定结果

4 讨论

全文结论

参考文献

致谢

声明

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摘要

子宫蓄脓是母犬常见的子宫细菌感染性疾病,如不及时诊治,常导致母犬死亡。 病例来源于2012年1月至2014年3月间来扬州大学动物医院就诊的病犬,其中闭合型子宫蓄脓20例、开放型子宫蓄脓23例。以来医院做绝育手术的17例健康母犬作为对照组。研究内容包括病例的临床调查(子宫蓄脓发病的年龄、品种、季节、生育史以及距最后一次发情的时间等)、血常规与血液生化的变化规律、细菌的分离培养鉴定、子宫壁病理组织学变化和TLR2、TLR4、ER、PR等相关蛋白在子宫壁免疫组化的变化。观察研究的结果如下: 子宫蓄脓的平均发病年龄为9.2±2.6岁,6岁以上子宫蓄脓病例占总数的90%,其中京巴犬占总数的39.5%,博美犬占16.3%,京巴犬和博美犬是子宫蓄脓易发的品种;发病时间平均在发情后1.5±0.4个月;子宫蓄脓发病一般在每年的4~7月份(67.5%)和9~11月份(22.6%);无生育史的犬占总子宫蓄脓病犬数的81.4%,说明生育可降低犬子宫蓄脓的发病率。 卵巢子宫摘除术前采集头静脉血液进行血常规和血液生化检测。结果表明闭合型和开放型子宫蓄脓犬的白细胞和嗜中性粒细胞显著高于对照组,且差异极显著(P<0.01);闭合型子宫蓄脓犬的白细胞和中性粒细胞高于开放型子宫蓄脓组,且差异显著(P<0.05)。闭合性和开放型子宫蓄脓犬的红细胞和红蛋白含量数均显著低于对照组。闭合型子宫蓄脓组的血清尿素氮和肌酐含量高于对照组和开放型子宫蓄脓组,且差异显著(P<0.05),可能与临床上出现多尿、烦渴等症状相关。闭合性和开放型子宫蓄脓组的血液球蛋白含量高于对照组,且差异极显著(P<0.01)。 无菌收集卵巢子宫切除术后的子宫腔内脓汁做细菌分离培养,在有氧和厌氧条件下培养于普通琼脂培养基、麦康凯培养基和血平板三种培养基上。细菌鉴定结果:在43例子宫蓄脓病例中大肠杆菌和绿脓杆菌感染各占总分离细菌数的52.6%和18.4%,此外还分离出肺炎克雷伯氏菌、黏质沙雷氏菌、粪肠球菌、表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌细菌。 子宫蓄脓的病理组织学变化:开放型子宫蓄脓以CEH为主,闭合型子宫蓄脓以鳞状化生和腺瘤样病变为主。子宫腺体分泌物增多,在子宫内膜上皮和腺上皮间有嗜中性粒细胞浸润。免疫组化结果表明,子宫蓄脓病犬子宫壁的TLR2、ER表达低于同一发情周期对照组的表达,TLR4、PR在子宫蓄脓组的表达高于同一发情周期对照组的表达;在子宫蓄脓病例中,TLR4的表达高于TLR2的表达,PR的表达高于ER的表达。 结论:临床上,犬子宫蓄脓可引起病犬血液WBC升高,RBC降低和肾功能损害。大肠杆菌和绿脓杆菌为犬子宫蓄脓的易感细菌,子宫内膜以囊性增生为主,子宫壁TLR4和PR显著表达。

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