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AMD3100抑制CXCR4/β-catenin信号通路抑制神经干细胞迁移分化的体外研究

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第1章 引 言

第2章 中枢神经干细胞培养及AMD3100对其增殖能力的影响

2.1 材料

2.2 实验方法

2.3 数据处理及统计学分析

2.4 结果

2.5 结论

第3章 AMD3100对中枢神经干细胞迁移分化的实验研究

3.1 材料

3.2 实验方法

3.3 数据处理及统计学分析

3.4 结果

3.5 结论

第4章 讨论

第5章 结论和展望

5.1 结论

5.2 展望

致谢

参考文献

读学位期间的研究成果

综述; SDF-1/CXCR4轴与脊髓损伤修复的研究进展

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摘要

目的：
　　探讨AMD3100通过CXCR4/β-catenin信号通路对中枢性神经干细胞增殖、迁移和分化的抑制作用。
　　方法：
　　1、悬浮法培养中枢神经干细胞，配制含AMD3100不同浓度梯度（0ug/L，40ug/L,80ug/L,160ug/L,320ug/L,640ug/L和1000ug/L）的培养基培养神经干细胞。分别在2小时、24小时、48小时、72小时用CCK8法检测各浓度梯度OD值，再分别计算各时间时的增殖抑制率。
　　2、根据前一步AMD3100抑制中枢神经干细胞增殖实验结果选择最适药物浓度为80ug/L和最佳作用时间为48小时。分别培养对照组（0ug/L）和AMD3100组（80ug/L）中枢神经干细胞48小时，划痕实验检测细胞迁移能力的变化，Western Blot检测神经干细胞标志物Nestin、神经元细胞标志物β-tubulin、Wnt、β-catenin和β-catenin（P-Tyr489）的表达情况。
　　结果：
　　1、CCK8法检测结果：各浓度梯度的AMD3100作用于神经干细胞后，随着时间的延长，80ug/L,160ug/L,320ug/L,640ug/L和1000ug/L各浓度下增殖能力逐渐降低，抑制率逐渐增高，在48小时和72小时，增殖能力均极显著低于0ug/L，差别具有统计学意义（P＜0.01），抑制率均达到50％以上；40ug/L浓度时增殖能力与0ug/L相比无明显差异（P＞0.05）。在2小时和24小时，随着浓度的增加各浓度梯度抑制率逐渐增加；在48小时和72小时160ug/L,320ug/L和640ug/L抑制率呈增加趋势，均低于80ug/L和1000ug/L，均高于24小时各浓度梯度抑制率。
　　2、划痕实验结果：在48小时AMD3100组细胞迁移面积百分比为(19.80%±1.83)，明显低于对照组（32.92%±2.64），差异具有统计学意义（P＜0.05）。Western Blot检测48小时AMD3100组Nestin、β-tubulin、β-catenin和β-catenin（P-Tyr489）的表达量均低于与对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。两组Wnt的表达量无明显差异（P＞0.05）。
　　结论：
　　1、AMD3100抑制中枢神经干细胞的增殖具有时间和浓度依赖性。
　　2、AMD3100抑制SDF-1/CXCR4轴可以抑制中枢神经干细胞的迁移和分化能力。
　　3、AMD3100可能是通过CXCR4/β-catenin通路抑制中枢神经干细胞的增殖迁移和分化。

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